Problema nello scongelamento delle cellule

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bianchinaa
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1 Messaggi

Inserito il - 22 gennaio 2012 : 18:08:54

Ciao! vi espongo il mio problema: sto coltivando una nuova linea cellulare, le 293t, crescono aderendo alla piastra. Le congelo utilizzando DMSO 10% + FBS 90%, trasferendole prima a -80� e dopo 48h sotto azoto.
Quando le scongelo (velocemente le tolgo dall'azoto e le metto a 37�C) si forma del gas (quando apro il criotubo si sente proprio lo sfiato, come quando si apre una lattina di coca cola!) e puntualmente le cellule muoiono quasi tutte.
A voi � mai capitato?! o sapete dirmi da cosa potrebbe dipendere?
Grazie.

domi84
Moderatore

Citt�: Glasgow

1724 Messaggi

Inserito il - 24 gennaio 2012 : 23:28:38

Come FBS 90%?
Io le congelo in DMEM, 10% FBS, 10% DMSO, 1 h a -20, 24-48h a -80 e poi in azoto...

Il mio blog: http://domi84.blogspot.com/
Le foto che ho scattato...