One hybrid and two hybrid..

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ramanda
Nuovo Arrivato

12 Messaggi

Inserito il - 18 gennaio 2010 : 17:28:00

Di nuovo ciao ragazzi,
la mia prof.ssa di ing.genetica,ha parlato di one hybrid
in sede di esame,ho ben chiaro il concetto di two hybrid e a
cosa serva,ma la prima tecnica non riesco proprio a capirla
o meglio..esiste?
c'� qualcuno che � pi� informato di me?

grazie
ramy

GFPina
Moderatore

Citt�: Milano

8408 Messaggi

Inserito il - 20 gennaio 2010 : 13:31:23

� la stessa cosa del two hybrid solo che la proteina � una sola, � una proteina di fusione che contiene sia il dominio di legame che quello di attivazione.
Trovi maggiori informazioni qui:
http://en.wikipedia.org/wiki/Two-hybrid_screening#One-hybrid
http://en.wikipedia.org/wiki/Bacterial_one-hybrid_system

se vuoi qualcosa in Italiano, anche se meno dettagliato puoi guardare ad es. questa presentazione:
Metodi per lo studio delle interazioni molecolari tra acidi nucleici e proteine

ramanda
Nuovo Arrivato

12 Messaggi

Inserito il - 20 gennaio 2010 : 15:30:32

Grazie mille GFPina,
tra l'altro nella presentazione in pwp
si parla anche di competitore freddo(EMSA),
era un dubbio anche quello..ora non pi�!
Quindi il competitore a"caldo" come lo chiama la
prof. sarebbe un frammento di dna da analizzare marcato terminalmente?al contrario di quello a freddo?
o sbaglio?probabilmente � una domanda idiota..ma la prof
non � ci si sia soffermata molto su queste tecniche!!
grazie tante!!

GFPina
Moderatore

Citt�: Milano

8408 Messaggi

Inserito il - 20 gennaio 2010 : 22:43:19

Non so cosa abbia detto la tua prof., in ogni caso per "caldo" si intende qualcosa di marcato "radioattivamente" (ad es. anche la stanza dove si lavora coi radioattivi viene chiamata "camera calda")

ramanda
Nuovo Arrivato

12 Messaggi

Inserito il - 22 gennaio 2010 : 10:36:08

ok..
grazie tante..

Nereus
Nuovo Arrivato

20 Messaggi

Inserito il - 23 novembre 2012 : 17:50:54

Riesumo il post, scusate ma io non ho capito una cosa. Ma nel costrutto usato per trasformare il lievito c'� un promotore seguito dal marker di selezione per le cellule che hanno integrato il costrutto e un marker di selezione per le cellule contenenti il fattore trascrizionale di interesse. Come si fa a far esprimere il primo marker in assenza di fattore trascrizionale? Il promotore senza fattore non dovrebbe consentire l'espressione del gene giusto? Oppure consente l'espressione solo del primo gene... non ho capito perch� a quel cavolo di marcatore non ci hanno dato un suo promotore costitutivo -.-
Help plz.

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