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Lord Garland
Nuovo Arrivato
3 Messaggi |
 Inserito il - 22 maggio 2013 : 22:38:06
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| Una hai il DNA genomico, te lo digerisci con certi enzimi di restrizione e sfrutti le estremità per clonarlo dentro a 'contentitori biologici per DNA (BAC, YAC ecc): in questo caso dentro alle seqeunze hai gli introni e i diversi esoni di eventuali splicing alternativi di quel gene. Nella liberaria di espressione tu parti da RNA (espresso). In altre parole: estrai RNA dalla cellula. Mediante retrotrascrittasi lo rendi copia del RNA (cDNA singolo filamento), poi mediante la Polimerasi classica lo copia e lo amplifica esponenzialmente e così hai una versione di DNA di un RNA che la cellula aveva espresso per farci una proteina specifica e che quindi non ha più introni (che evtnualmente è uno splisato alternativo). Tutti questi frammenti te li cloni in altri BAC YAC ecc, fino a farne un numero elevato --> libreria di espressione |
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Librerie di DNA
Didattica
chi mi sa dire qual'è la differenza sostanziale tra librerie genomiche e librerie di cDNA. Contengono entrambe una serie di molecole di DNA che rappresentano nel complesso l'intero genoma di un organismo. Ma allora qual'è la differenza tra le due?
