Salve a tutti! Finalmente mi sono decisa ad iscrivermi, vi leggo da sempre!! Domanda: dopo knockdown genico con shRNA in cellule K562 con una PCR come e' possibile che io veda una banda corrispondente al gene silenziato? E' possibile che il silenziamento non sia andato a buon fine? Dovrei vedere il "nulla" o si deve sempre e comunque ottenere una bandina? Non lo capisco...se spengo il gene questo non c'e', giusto? Illuminatemi! Grazie
anche se la domanda è di un po' di tempo fa provo a risponderti,magari ti interessa ancora! con un siRna si fa un silenziamento ma a livello post-trascrizionale,quindi è l'mRNA che viene degradato o se ne impedisce la traduzione,non avendo così la proteina. a livello di Dna non cambia nulla a meno che non faccio un knockout, ma è una cosa diversa.