| Autore |
Discussione |
|
|
moonlight90
Nuovo Arrivato
1 Messaggi |
 Inserito il - 03 marzo 2015 : 08:53:59
|
 Scritto da MolecularLab Mobile
Buon giorno a tutti, da poco mi sto cimentando in clonaggi....ho un frammento di DNA amplificato con primer contenenti già siti di restrizione ora il mio dubbio è: una volta purificata la pcr da agarosio devo ridigerire la pcr prima di inserirla nel plasmide???????
|
|
|
|
|
Lannister
Nuovo Arrivato
5 Messaggi |
 Inserito il - 03 marzo 2015 : 23:12:19
|
| Si, perché la polimerasi ha amplificato tutto il frammento, su entrambi i filamenti, e ti ha dato una molecola ad estremità piatte... adesso il dna va digerito per ottenere le estremità sticky che ti permetteranno di inserirlo nel plasmide |
 |
|
|
là
Utente Junior
565 Messaggi |
Inserito il - 04 marzo 2015 : 18:18:42
|
| E il plasmide deve essere digerito con gli stessi enzimi di restrizione. |
|
|
|
Geeko
Utente
Città: Milano
1043 Messaggi |
Inserito il - 04 marzo 2015 : 22:23:39
|
| Se invece usi il sistema TA/TOPO cloning non ne avresti bisogno! |
|
|
|
| |
Discussione |
|
clonaggio
Didattica
