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Piper
Nuovo Arrivato

1 Messaggi

Inserito il - 19 novembre 2016 : 22:46:33

Salve a tutti,

avrei bisogno del vostro aiuto in quanto sto per iniziare a lavorare on i miRNA, ma avrei qualche dubbio sulla loro analisi in qRT-PCR

. Il mio dubbio nasce dal fatto che se penso alla classica qRT-PCR per un qualsiasi gene, prima valuto in semi quantitativa se il gene è presente, poi procedo all'allestimento di una curva standard (E1-E10) e poi alla valutazione di quanto è espresso il mio gene in quel particolare tessuto o linea cellulare. In relazione a questo mi chiedo, come devo procedere con i miRNA?

Ringrazio in anticipo chiunque mi aiuterà a fare chiarezza e a capire bene come muovermi in questo mondo per me totalemente nuovo.

là
Utente Junior

565 Messaggi

Inserito il - 21 novembre 2016 : 16:03:47

Ciao!
Per valutare i livelli di un miRNA che sto studiando utilizzo un kit commerciale fatto apposta per valutarne l'espressione. Nel datasheet del kit è scritto tutto, dalla Tm del primer (che è specifico per il tuo miRNA e che acquisti a parte) al programma da utilizzare per l'amplificazione.