Salve! Mi è stato affidato un compito che devo risolvere in breve tempo e non so davvero che fare. Da nostri collaboratori giapponesi abbiamo ricevuto 3 nuove strain di ratti transgenici Lewis: 1- GFP+ 2-RFP+ e 3-LacZ+. Mi è stato richiesto di ottimizzarne il GENOTYPING. Qualcuno mi può dare dei consigli sul come farlo? Peripheral Blood o DNA da tessuto tipo orecchio? E inoltre... come disegnare i miei primer? Grazie mille a tutti
Questo è il protocollo che usiamo per i nostri topi transgenici. Noi usiamo DNA dalla coda, ma un tessuto vale l'altro. Sicuramente tra le tue due opzioni sceglierei orecchio.
Per quanto riguarda i primers: GFP, RFP e LacZ sono così usati che probabilmente puoi prendere tranquillamente i primer da un qualsiasi lavoro, magari di questi collaboratori. Alternativamente guarda qui: http://www.molecularlab.it/forum/topic.asp?TOPIC_ID=1655