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 PCR - GFP - RFP- LacZ
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monta18
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1 Messaggi

Inserito il - 21 novembre 2007 : 01:00:09  Mostra Profilo  Visita l'Homepage di monta18 Invia a monta18 un Messaggio Privato  Rispondi Quotando
Salve!
Mi è stato affidato un compito che devo risolvere in breve tempo e non so davvero che fare. Da nostri collaboratori giapponesi abbiamo ricevuto 3 nuove strain di ratti transgenici Lewis: 1- GFP+ 2-RFP+ e 3-LacZ+.
Mi è stato richiesto di ottimizzarne il GENOTYPING.
Qualcuno mi può dare dei consigli sul come farlo? Peripheral Blood o DNA da tessuto tipo orecchio? E inoltre... come disegnare i miei primer? Grazie mille a tutti

chick80
Moderatore

DNA

Città: Edinburgh


11491 Messaggi

Inserito il - 21 novembre 2007 : 04:10:09  Mostra Profilo  Visita l'Homepage di chick80 Invia a chick80 un Messaggio Privato  Rispondi Quotando
Questo è il protocollo che usiamo per i nostri topi transgenici. Noi usiamo DNA dalla coda, ma un tessuto vale l'altro. Sicuramente tra le tue due opzioni sceglierei orecchio.

http://www.molecularlab.it/protocolli/protocol.asp?id=8

Per quanto riguarda i primers: GFP, RFP e LacZ sono così usati che probabilmente puoi prendere tranquillamente i primer da un qualsiasi lavoro, magari di questi collaboratori.
Alternativamente guarda qui:
http://www.molecularlab.it/forum/topic.asp?TOPIC_ID=1655

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