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DocPulciBiotek
Nuovo Arrivato


Prov.: Milano
Città: milano


2 Messaggi

Inserito il - 09 febbraio 2008 : 09:57:16  Mostra Profilo  Visita l'Homepage di DocPulciBiotek Invia a DocPulciBiotek un Messaggio Privato  Rispondi Quotando
ciao!
chi saprebbe gentilmente spiegarmi xkè la Multiplex Pcr non va a plateau?
grazie anticipatamente!!!

Prima di parlare sii sicuro che le tue parole siano meglio del Silenzio

chick80
Moderatore

DNA

Città: Edinburgh


11491 Messaggi

Inserito il - 09 febbraio 2008 : 21:57:21  Mostra Profilo  Visita l'Homepage di chick80 Invia a chick80 un Messaggio Privato  Rispondi Quotando
Hmmmm... forse bisogna chiarire un po' la situazione.

Multiplex significa semplicemente che vai a guardare più geni insieme (cioè usi più coppie di primers).
C'è poi la differenza fra PCR "classica" e PCR real-time. Nella PCR real-time vai a guardare l'amplificazione al passare del tempo, cioè PRIMA che raggiunga il plateau.

QUALSIASI reazione di PCR se portata avanti per un sufficiente numero di cicli arriva a plateau, semplicemente i risultati che ti dà la realtime sono presi prima di quel momento!

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francesca77
Nuovo Arrivato


Prov.: Milano
Città: milano


13 Messaggi

Inserito il - 10 febbraio 2008 : 16:37:24  Mostra Profilo  Visita l'Homepage di francesca77 Invia a francesca77 un Messaggio Privato  Rispondi Quotando
Princilamente la multiplex può essere uitlizzata per fare analisi di frammenti o SNaPshot ma, può essere anche utile in altri casi?
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chick80
Moderatore

DNA

Città: Edinburgh


11491 Messaggi

Inserito il - 10 febbraio 2008 : 21:27:57  Mostra Profilo  Visita l'Homepage di chick80 Invia a chick80 un Messaggio Privato  Rispondi Quotando
Sì, ad esempio qualsiasi realtime in cui tu voglia avere un controllo interno (es. 18s)

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Luca Beretta
Nuovo Arrivato


Città: Milano


12 Messaggi

Inserito il - 12 febbraio 2008 : 10:13:20  Mostra Profilo  Visita l'Homepage di Luca Beretta Invia a Luca Beretta un Messaggio Privato  Rispondi Quotando
Grande chick80!
anche per le PCR vale il discorso del cannibalismo...il più forte vince sul più debole. C'è competizione tra primers per lo stesso templato. Quindi se lavorate in Real Time, l'endogeno mettetelo primer limited (molti meno primers rispetto al gene target...es 900nM finale di ciascun primer per il target, solo 300nM per l'endogeno... i saggi Housekeeping già pronti di Applied almeno funzionano così...
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