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Gio84
Nuovo Arrivato
Città: Pisa
5 Messaggi |
 Inserito il - 12 febbraio 2008 : 19:44:40
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Qualcuno saprebbe gentilmente spiegarmi in maniera semplice e comprensibile il PHAGE DISPLAY e la tecnica del DOPPIO IBRIDO?? Pleeeaaase! Vi ringrazio!
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Memole84
Nuovo Arrivato
Città: Siracusa
8 Messaggi |
 Inserito il - 12 febbraio 2008 : 19:46:32
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devi fare per caso esami il 14...
con una certa prof dente...
magari di complementi di biolog molecol....? |
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Gio84
Nuovo Arrivato
Città: Pisa
5 Messaggi |
Inserito il - 12 febbraio 2008 : 19:50:13
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Eh si, ci si vede giovedì alla fontina??  |
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Cri
Nuovo Arrivato
Città: Rovigo
68 Messaggi |
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Gio84
Nuovo Arrivato
Città: Pisa
5 Messaggi |
Inserito il - 12 febbraio 2008 : 19:58:40
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Grazie! |
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Memole84
Nuovo Arrivato
Città: Siracusa
8 Messaggi |
Inserito il - 12 febbraio 2008 : 20:02:54
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Con il phage display ho problemi anch`io... quindi non sono proprio la persona giusta!!!
Per il doppio ibrido posso provarci... dunque, e` una metodologia adottata per lo studio di interazioni tra proteine, che sfrutta il legame tra AD(DOMINIO DI ATTIVAZIONE) E BD(dominio di legame)di un fattore di trascrizione che porti per esempio alla trascrizione di un gene (reporter) capace di modificare il fenotipo delle colonie di lievito che uso per l`esperimento.
Se io fondo le mie due proteine (x e y) da testare una a AD e l`altra a BD, le inserisco nelle cellule di lievito e noto il cambiamento fenotipico delle colonie, cio significa che le due proteine hanno interagito ( e quindi AD e BD poste in vicinanza hanno portato a trascrizione del gene reporter).
x+AD e y+BD se x interagisce con y allora AD e BD saranno poste in vicinanza e quindi si avra trascrizione del gene reporter (visualizzabile sulle colonie)
Spero di esserti stata d` aiuto!!
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Memole84
Nuovo Arrivato
Città: Siracusa
8 Messaggi |
 Inserito il - 12 febbraio 2008 : 20:06:42
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A giovedi...
E speriamo bene!!! |
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Gio84
Nuovo Arrivato
Città: Pisa
5 Messaggi |
Inserito il - 12 febbraio 2008 : 20:06:54
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| Ti ringrazio, è sicuramente più chiaro...per il Phage Display vedi il link che ha inserito Cri, sarà sempre più chiaro di ciò che c'è scritto sulle fotocopie della prof! A giovedì |
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Cri
Nuovo Arrivato
Città: Rovigo
68 Messaggi |
Inserito il - 12 febbraio 2008 : 20:07:50
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| Trovi qualcosa nel forum utilizzando la funzione cerca !! |
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carlavanzato
Nuovo Arrivato
Città: caltanissetta
14 Messaggi |
Inserito il - 12 febbraio 2008 : 22:24:34
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Ciao Giò, io so ke cos'è la phage display però nn so se riuscirò ad essere molto chiara, xò ci provo: la proteina di interesse ,o cmq il suo frammento antigenico,viene clonato in uno fago filamentoso come M13, ke esprime delle proteine in superficie. Quindi si dovrebbe creare un gene di fusione ke dia origine ad una proteina ibrida, cioè formata da frammenti della proteina di membrana propria del fago e dalla nostra proteina di interesse, in pratica il fago esporrà in superficie la proteibìna ke abbiamo clonato. A questo punto le particella fagiche vengono isolate con l'ormone, l'anticorpo, substrato...insomma con il ligando diretto contro la proteina che abbiamo clonato, per verificare se effettivamente quel ligando è specifico per quella proteina.Ovviamente quando dico clonare la proteina intendo il gene ke codifica tale proteina. So di nn essermi espressa molto bene ,odio spiegare le cose scrivendole, cmq spero di esserti stata utile, in bocca al lupo
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phage display e doppio ibrido [ERA:Aiuto!]
Didattica
