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Valentina24424
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21 Messaggi |
 Inserito il - 06 gennaio 2009 : 17:20:33
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Uno sperimentatore rileva la reazione catalizzata dalla fumarasi
monitorando, mediante metodi spettrofotometrici, la scomparsa del
fumarato (il substrato della reazione). In tal modo egli misura i
seguenti valori di concentrazione di fumarato in funzione del
tempo:
Fumarato(mM)
5.0
4.8
4.6
4.4
Tempo (secondi)
0
30
60
90
a) Lo sperimentatore deduce che la concentrazione iniziale di
fumarato presente nel test è molto maggiore della Km. Si spieghi
perchè. b) Si calcoli inoltre la velocità di reazione. c) L’
enzima è composto di 4 subunità uguali di massa molecolare di
48.5 kDa. Poichè nella miscela di reazione la concentrazione
enzimatica è di 0.404 mg/l si calcoli infine il numero di
turnover riferito alla singola subunità.
Grazie di cuore
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Valentina24424
Nuovo Arrivato
21 Messaggi |
Inserito il - 06 gennaio 2009 : 20:17:12
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Raga io l'ho risolto così, vi prego mi dite se è giusto?
Calcolo velocità scomparsa fumarato:
([f]finale-[f]iniziale)/(Tfinale-Tiniziale)
4,4mM-5mM/90s-0s = 0,006 mM/s
spariscono 0,006 mM/s di fumarato
Il numero di turnover l'ho calcolato così:
so che la velocità di scomparsa del fumarato è 6,0x10^-6 mol/s
so che 1 subunità di enzima pesa 48500 uma e quindi tutto l'enzima è 194000 uma e pertanto 1 mole di enzima pesa 194.000g.
Io però ho soltanto 0,404 mg di enzima nella mia soluzione, che corrispondono a:
1 mol enzima:194000g = Xmol enzima:0,000404g
X= 2,0x10^-9
In soluzione ho quindi 2,0x10^-9 moli di enzima.
Il numero di turnover sarà pertanto:
6,0x10^-6 mol/s
_________________
2,0x10^-9 mol enzima
risultato = 3000 s^-1
Ma il problema richiede il numero di turnover di una singola subunità e quindi faccio diviso 4:
3000/4 = 750 s^-1
E' giusto?Oppure non ci ho capito niente :(
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Problema: monitoraggio spettrofotometrico fumarasi
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