Enzima UNG in PCR

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pippi1979
Nuovo Arrivato

5 Messaggi

Inserito il - 23 gennaio 2009 : 08:26:36

Ciao,
potreste spiegarmi il ruolo specifico dell'enzima UNG nella reazione di PCR? Se utilizzo una master mix che lo contiene per effettuare il primo step d'amplificazione in una reazione di sequenziamento ottengo comunque la sequenza?
Grazie a tutti...

darspe2000
Nuovo Arrivato

Prov.: Basilea
Città: Basilea

15 Messaggi

Inserito il - 23 gennaio 2009 : 12:06:25

La mix contenente l’enzima UNG (Uracil-N-glicosilasi) e una miscela di nucleotidi con dUTP. La presenza di questo nucleotide previene la contaminazione da “carry-over” di DNA da precedenti reazioni di PCR. Il trattamento con l’enzima UNG all’inizio del programma di amplificazione rimuove i residui di uracile da molecole di DNA contenenti dU e impedisce che queste fungano da templato per la reazione di amplificazione.