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Discussione |
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ariell
Nuovo Arrivato
Prov.: Caserta
4 Messaggi |
 Inserito il - 20 settembre 2007 : 12:49:46
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ciao a tutti!!ho bisogno del vostro aiuto.devo fare l'esame di genetica ma non riesco a capire il test di fluttuazione,l'esperimneto del replicaplating,il tes di ames e la mutazione da inserzione nell'operone gal.vi prego...HELP!!!!rispondetemi al piu presto.BACIONI a tutti!!!
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Iside
Utente Attivo
Città: Napoli
1375 Messaggi |
Inserito il - 20 settembre 2007 : 14:23:20
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per il replica plating guarda wikipedia , è abbastanza chiaro poi se ti servono chiarimenti chiedi pure.
il test di Ames valuta la capacità di alcune sostanze di indurre mutagenesi. Si esegue su ceppi di S.Typhimurium auxotrofi per istidina (dunque istidina negativi), il che significa che questi batteri non sono in grado di crescere in assenza di istidina, perchè presentano una mutazione dei geni coinvolti nella biosintesi di questo aa. Se hai una sostanza che sospetti essere mutagena puoi incubare i tuoi ceppi con il terreno privo di His e la sostanza da testare: in questo modo osservi se anche in assenza di His ci sono batteri in grado di formare colonie e questo significa che la tua sostanza è effettivamente un mutageno perchè è stata in grado di revertire la mutazione originaria (prima i batteri necessitavano di his ed ora non più.) Questa tecnica è ancora oggi valida ma ha un forte limite e cioè si basa sull'uso di cellule procariotiche per cui non si può stabilire una correlazione lineare tra mutagenesi indotta nel genoma batterico e l'eventuale potere mutageno sul DNA umano.
Il test di fluttuazione invece fi ideato da Salvatore Luria e servì a dimostrare la natura casuale e la trasmissione delle mutazioni nel genoma dei batteri. Nello specifico non mi ricordo come si esegue il test, ma il principio è questo: Luria utilizzò delle colonie batteriche e le infetto con un fago.
Se la resistenza al fago fosse stato un fenomeno indotto dalla stessa infezione, le colonie resistenti avrebbero contato un numero di batteri resistenti molto simile tra loro. Se invece il virus selezionava batteri già resistenti, la distribuzione degli individui sopravvissuti all'infezione sarebbe dovuto risultare diseguale, con valori "fluttuanti" da una coltura all'altra, che è esattamento ciò che accade, mostrando anche come la resistenza è trasmessa ereditariamente.(se non sbaglio la trasmissione di queste mutazioni avviene grazie a geni di resistenza posizionati su plasmidi, qui entra in gioco la coniugazione, ma non ne sono sicurissima, correggettemi).
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...we're just two lost souls swimming in a fishbawl...year after year...
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NyNa
Nuovo Arrivato
46 Messaggi |
Inserito il - 20 settembre 2007 : 16:21:40
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Ciao! Il replica plating ti serve per evidenziare la crescita di colonie (mutate, retromutate, trasformate...) su un terreno selettivo. Si effettua con
- un cilindro,
- un panno di velluto,
- la piastra madre
- una capsula Petri con il terreno selettivo.
Ciao ciao Spero di esserti stata utile... |
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memole
Utente Junior
Prov.: Brindisi
Città: brindisi
577 Messaggi |
Inserito il - 22 settembre 2007 : 21:41:28
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Quello che dice Iside è corretto solo vorrei fare una precisazione: Luria fece due allestimenti differenti per quanto riguarda il suo esperimento. Nel primo allestimento prelevò le aliquote da piastrare tutte dalla coltura madre e ottenne un numero di colonie simile in tutte le piastre. Nel secondo allestimento prelevò aliquote di cellule e le fece duplicare separatamente in diverse provette prima di piastrarle. I risultati che ottenne furono diversi:
-dal primo allestimento ricavava un numero di colonie simili in tutte le piastre, in ragione del fatto che i batteri derivavano tutti dalla medesima coltura;
-nel secondo allestimento ottenne un numero di colonie variabile, e questo dipendeva dal fatto che le cellule derivavano da colture diverse, ed in esse la mutazione poteva insorgere in generazioni differenti e pertanto il numero di cellule resistenti era variabile.
Da questo dedusse che la mutazione è un evento casuale e non indotto dal fago. |
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erendil
Nuovo Arrivato
2 Messaggi |
Inserito il - 23 settembre 2007 : 17:08:11
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Riguardo al test di Ames,c'è da precisare che,nella piastra insieme ai batteri viene generalmente messa una certa quantita di enzimi (estratti pancreatici e di fegato di topo)xke è possibile che alcne sostanze di per sè innocue, diventino mutagene solo se elaborate da enzimi metabolici dell'organismo.come puo benissimo accadere il contrario,cioe enzimi del fegato possono inattivare delle sostanze.
ciaooo |
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terreno85
Utente Junior
235 Messaggi |
Inserito il - 21 aprile 2009 : 13:14:50
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| Bhe si la teoria la sapete , ma secondo voi perchè la sostanza mutagena che vuoi testare è in grado di far revertere la mutazione His in Salmonella ?? |
Una teoria può esserre provata da un esperimento. Ma nessun percorso guida dall'esperimento alla nascita di una teoria |
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chick80
Moderatore
Città: Edinburgh
11491 Messaggi |
Inserito il - 21 aprile 2009 : 13:29:25
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Citazione:
Bhe si la teoria la sapete , ma secondo voi perchè la sostanza mutagena che vuoi testare è in grado di far revertere la mutazione His in Salmonella ??
Non capisco la domanda scusa... se vuoi sapere perchè si ha proprio una retromutazione di His è semplicemente un fatto statistico. Si prende His perchè porta ad un fenotipo facile da vedere. Potresti farlo con un qualsiasi altro gene. |
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genetica: fluttuazione, replica plating, ames,...
