Quanto è utile/interessante questa discussione:
| Autore |
Discussione |
|
|
sofiaaa
Nuovo Arrivato
2 Messaggi |
 Inserito il - 02 dicembre 2009 : 19:15:01
|
devo preparare un articolo per un esame e non capisco un punto chiave. aiutatemi, mi basta sapere l'argomento in linea generale, tanto per sapere cosa e dove andare a cercare.
quest'articolo è uno studio in vitro sulle variazioni di espressione di geni target (Z,Y) rispetto al gene X. si parla quindi di induzione di Z e Y mediata dal gene X: preso un estratto di embrione, lo si mette in vitro e si coltiva in "X-CONDITIONED MEDIUM".ma cosa significa?? non è spiegato bene. Credo che si tratti di ottenere cDNA di X per coniugarlo con un promotore che lo mantenga espresso, e cDNA+promotore aggiungerli al mezzo di coltura.
Ma non si potrebbe anche invece parlare di introduzione nel mezzo di coltura della PROTEINA di X??
Queste due ipotesi potrebbero essere entrambe valide?
Ma di che tecnica stiamo parlando? Non sapendo se si tratta di induzione genica o altro, non so dove andare a cercare per studiare i dettagli.
Spero non sia troppo complicato, ho cercato di renderla più chiara possibile.
Ciao, grazie se riuscite a chiarirmi qualcosa.
Sofia
|
|
|
|
|
Iside
Utente Attivo
Città: Napoli
1375 Messaggi |
Inserito il - 03 dicembre 2009 : 16:50:34
|
non lo so se ho capito bene (probabilmente no), però detta così sembra che X influenzi l'espressione di Y e Z però l'espressione di X è legata a quanche altro fattore, che so, un ormone. per cui, per studiare appunto questa induzione, coltivano l'estratto di embrione ( ma poi cosa sarebbe?) in un terreno permissivo, cioè un conditioned medium.
cito: "conditioned media are used for the cultivation of particularly cells and cell lines (see, for example: ES cells) because they contain many mediator substances that were secreted by the cells cultivated in this medium. These mediator substances contain growth factors and cytokines and may promote the growth of new cells and may help them to "take"."
quindi, se X ha bisogno di un ormone per esprimersi, nel conditioned medium aggiungono proprio quell'ormone, X viene espresso e regola l'espressione di Y e X che poi è quella che interessa loro.
a dirla tutta mi sembra che tu l'abbia reso un po' difficile con il tuo ragionamento (ma sempre se ci ho azzeccato). sarebbe in ogni caso interessante se tu potessi ricopiare un pezzo più esteso in lingua originale, così da capirci di più.
 |
...we're just two lost souls swimming in a fishbawl...year after year...
|
 |
|
|
sofiaaa
Nuovo Arrivato
2 Messaggi |
Inserito il - 03 dicembre 2009 : 18:11:27
|
ciao iside!! allora innazitutto grazie di avermi risposto.
a dire il vero è un pò complicato da spiegare, ma non parlano di ormoni..
in pratica credo introducano X come proteina (!) in un pezzo di embrione che normalmente non esprime X per studiare le variazioni di espressione che X induce (indurrebbe) su altri geni target (Y e Z)..
quello che non capisco io è COSA usano per rappresentare il segnale X là dove non c'è.
e in effetti usano sia la proteina che cell esprimenti in modo forzato X poi introdotte in coltura.
l'articolo comunque è a questo link: http://www.molbiolcell.org/cgi/content/full/16/11/5283
vabeh ma non importa. è che odio quando i materiali e i metodi sono troppo sintetici!!
damn!
grazie di avermi risposto...
ciaociaoooo |
|
|
| |
Discussione |
|
|
|
Quanto è utile/interessante questa discussione:
| MolecularLab.it |
© 2003-18 MolecularLab.it |
|
|
|
aiuto tecnico/teorico
Didattica
