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Caffeina
Nuovo Arrivato

3 Messaggi

Inserito il - 01 febbraio 2010 : 16:36:18

c'� qualcuno che sa dirmi quali metodi per la quantificazione delle proteine si possono usare quando si prepara un omogenato di tessuto in cui sono stati aggiunti inibitori delle proteasi.
Normalmente uso il metodo di Lowry, ma il cocktail di inibitori delle proteasi interferisce con questo metodo.
grazie

titty-80
Nuovo Arrivato

9 Messaggi

Inserito il - 10 febbraio 2010 : 12:41:46

ciao!
io lavoro con cellule, quindi per i tessuti dovrai fare una digestione molto pi� spinta...
cmq io utilizzo come inibitori delle proteinasi PMSF e ortonovadato di sodio e non mi danno nessun problema di interferenza con il saggio di determinazione proteica BRADFORD.
in particolare, uso il reagente della biorad 500-0006.
in una cuvetta da spettrofotometro metto 800 ul di acqua, il campione (dipende da quanto pensi sia concentrato, in genere io utilizzo dai 2 ai 5 ul di campione) e 200 ul del reagente. vortexo e leggo allo spettrofotometro (595 nm) dopo almeno 5 min di incubazione.
fammi sapere