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roselady
Nuovo Arrivato

Prov.: Napoli
Città: napoli


119 Messaggi

Inserito il - 04 novembre 2010 : 20:22:32  Mostra Profilo  Visita l'Homepage di roselady Invia a roselady un Messaggio Privato  Rispondi Quotando
Ciao a tutti,avrei un dubbio da esporre!
In laboratorio ho centrifugato delle cellule di E.coli ed ho poi conservato il pellet cellulare a -80°C.
In seguito ho risospeso le cellule in sample buffer e riscaldato i campioni ottenuti a 100°C per 30 minuti.Tutto questo per fare una SDS PAGE per verificare che non ci fossero contaminanti. POI ho ffettuato una french press del pellet.
Ora mi chiedo: il pellet cos'è??? cioè io lo so,ma la dottoranda mi ha confuso non poco le idee di base ke avevo!
se io faccio una centrifugazione vuol dire che ho lisato le cellule e in pratica faccio la sds page delle risultanti proteine (o no? ) .
Perchè il pellet lo liso con french press? non avevo gia fatto la centrifugazione in precedenza?
( per chiarire le idee sto facendo questo per una immunoprecipitazione... )
SCUSATE per la mia ignoranza,ma vi ripeto mi hanno confuso troppo le idee :(
Grazie mille!

paolo865
Utente Junior


Prov.: Como
Città: Olgiate Comasco


262 Messaggi

Inserito il - 04 novembre 2010 : 22:06:36  Mostra Profilo  Visita l'Homepage di paolo865 Invia a paolo865 un Messaggio Privato  Rispondi Quotando
nel pellet ci sono le proteine che restano associate alle membrane probabilmente
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roselady
Nuovo Arrivato

Prov.: Napoli
Città: napoli


119 Messaggi

Inserito il - 05 novembre 2010 : 15:31:56  Mostra Profilo  Visita l'Homepage di roselady Invia a roselady un Messaggio Privato  Rispondi Quotando
ho capito ,adesso ha piu un senso o.O
Grazie!
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