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masira
Nuovo Arrivato


Prov.: ascoli piceno
Città: ascoli piceno


8 Messaggi

Inserito il - 28 febbraio 2011 : 12:16:37  Mostra Profilo  Visita l'Homepage di masira Invia a masira un Messaggio Privato  Rispondi Quotando
Salve a tutti,
volevo un'informazione:
Dovendo fare una reazione di PCR per amplificare un'inserto, qual'è la quantità ideale di DNA da mettere all'interno della miscela di reazione?
e il numero di cicli di reazione? 35, che ne dite? utilizzo come Polimerase la Pfu, che ha la capacità di correggere gli errori.

SpemannOrganizer
Utente

Spemann

Città: Los Angeles


955 Messaggi

Inserito il - 28 febbraio 2011 : 13:21:50  Mostra Profilo  Visita l'Homepage di SpemannOrganizer Invia a SpemannOrganizer un Messaggio Privato  Rispondi Quotando
se è plasmide anche 30 ng (nanogrammi) vanno bene.
Se è genomico ( ma nn credo trattandosi di inserto) puoi mettere di piu, anche 100 ng.

Numero di cicli? direi 30-35 vanno bene (ma anche meno).

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masira
Nuovo Arrivato


Prov.: ascoli piceno
Città: ascoli piceno


8 Messaggi

Inserito il - 28 febbraio 2011 : 16:49:27  Mostra Profilo  Visita l'Homepage di masira Invia a masira un Messaggio Privato  Rispondi Quotando
Grazie mille per il consiglio!
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