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ESTRAZIONE DNA

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viviana sarnataro
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1 Messaggi

Inserito il - 11 gennaio 2019 : 11:21:01

Buongiorno a tutti. Vi scrivo per conoscere che tipo di protocollo utilizzate per l'estrazione del dna da colure cellulari di campioni di prenatale( la e villo coriale). la quantizzazione in seguito all'estrazione appare nella norma (rapporti 260/280, 260/230)anche se il campione ha una resa pessima per la successiva tecnica- array cgh...avete qualche dritta da darmi?
il protocollo che utilizzo prevede il distacco dell cellule da flk mediante tripsina, lavaggio in pbs, lisi con buffer perkin elmer con aggiunta di rnasi e proteinasi. aggiunta di MPC protein EPICENTRE, A SEGUIRE CENTRIFUGAZIONE E precipitazione in ISOPROPANOLO E ETANOLO 70%. Risospensione in buffer TE. GRAZIE RESTO IN ATTESA DI RISPOSTA

AlexiaMas
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1 Messaggi

Inserito il - 02 luglio 2020 : 17:51:39

Buonasera, mi ritrovo ad avere lo stesso problema. Hai risolto? Dopo i lavaggi del flask con PBS, procedo con il distacco meccanico delle cellule mediante scraper, centrifugo ed aggiungo il buffer di lisi al pellet cellulare. Fatto ci�, procedo con un kit basato sulla metodica a colonnine