Southern blotting: a cosa serve

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Ross.bio
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2 Messaggi

Inserito il - 07 novembre 2018 : 05:09:32

Scritto da MolecularLab Mobile

Buongiorno. Sto studiando per l'esame di genetica, ma c'� un punto della parte della tecnologia del DNA che non ho ben capito: il Southern blotting. Diciamo che voglio studiare un determinato gene: per farlo ho bisogno di amplificarlo, per cui lo inserisco in un vettore e trasformo i batteri. A questo punto analizzo le colonie e prelevo quelle che hanno quelle caratteristiche che mi pernettono di riconoscere l'avvenuta trasfomazione con il vettore contenente il mio gene di interesse. A questo punto di cosa me ne faccio del Southern Blotting? La procedura l'ho capita, ma quello che non ho afferrato � l'uso che me ne posso fare nel mio caso

domi84
Moderatore

Citt�: Glasgow

1724 Messaggi

Inserito il - 07 novembre 2018 : 09:36:35

Il southern blot � una tecnica ormai in disuso (io non l'ho mai vista). Serviva a identificare uno specifico gene (fra tanti) con una sonda (di solito radioattiva). Oggi si usa la PCR, � pi� facile, veloce, versatile e non radioattiva.

Quello che stai descrivengo mi sembra il clonaggio di un gene...e il southern blot mi sembra completamente fuori luogo, quindi non ti so dire di pi�. Di solito il clonaggio finisce con una digestione diagnostica o un sequenziamento per dimostrare che il clonaggio � corretto.

Il mio blog: http://domi84.blogspot.com/
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