Mendel
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Inserito il - 17 ottobre 2014 : 12:30:47
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Come si fa il sequenziamento del DNA di un paziente per scoprire se č eterozigote per un esone? Si aggiunge un primer forward, un primer reverse o entrambi?
Io fino ad ieri sapevo che si mettesse un solo primer, aldilā se fosse forward o reverse, ma quando mi hanno mostrato il ferogramma ho visto che il confronto con la sequenza wild-type veniva fatto con la sequenza forward e la sequenza reverse in esame, per cui se una di queste cambiava rispetto a quella wild-type allora significava che il paziente aveva un esone eterozigote.
Sinceramente non ho capito cosa c'entrino le sequenze forward e reverse nel sequenziamento. Quest'ultime si riferiscono alla PCR, mica al sequenziamento?
C'č qualcuno che ha la pazienza di chiarirmi un po' le idee?
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