differenziare le linea cellulare MEG-01 con TPO (100ng)

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MEG-01 cells differenziamento delle piastrine TPO trombopoietina megacariociti

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PIM3
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Inserito il - 26 aprile 2017 : 16:35:09

Gentili utenti,

Al momento sto cercando di differenziare la linea cellulare MEG-01 in piastrine usando la trombopoietina(TPO)100ng.
Per regolarmi sulla tempistica del differenziamento ho usato questi articoli scientifici:

窢牋牋牋� 24h � pseudopodia (Yang et al., 2016) with 80 ng TPO

窢牋牋牋� 48h � platelet-like particles (Risitano et al., 2012) 爓ith 100ng TPO

Io ho usato un "6 wells plate" con 3mL di medium per well ed una densita' cellulare di 0.3 x 106. Inoltre ho aggiunto 100ng di trombopoietina(TPO).
Dopodiche' ho controllato le cellule ogni 6-12 ore al microscopio.
Questi sono i miei risultati:

1.Dopo 24h爊on sono comparsi pseudopodi.
2.Dopo 48h non sono comparse "proto-platelets"
3.Gli "Pseudopodia" sono comparsi solo in alcuni megacariociti dopo 60h di incubazione in TPO.

Le mie domande:

1- Quanto ci mettone le MEG-01 cells a differenziarsi in piastrine usando 100ng di TPO? Dovrei usare una concentrazione maggiore?

2- Durante l'incubazione dovrei aggiungere TPO ogni giorno e soltanto quando cambio il medium alle cellule?

3- Ho allegato due foto delle mie cellule dopo 60h di incubazione con 100ng TPO. Vorrei chiederVi se qualcuno mi puo ocnfermare che questi "ragnetti" che si vedono sono megacariociti con gli pseudopodi.

Qualsiasi tipo di aiuto sara' estremamente apprezzato.

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