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sirenetta
Nuovo Arrivato
Città: salerno
6 Messaggi |
 Inserito il - 11 febbraio 2011 : 13:16:31
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Ciao a tutti,
scusatemi se vi pongo una domanda banale ma avrei bisogno di rendermi conto se quello che so sulla costruzione di una curva standard per Real Time PCR è giusto oppure no!
Per costruire una retta di taratura, per un determinato RNA che devo analizzare, devo:
-produrre in vitro un RNA identico a quello di mio interesse;
-retrotrascriverlo;
-fare real time su quantità diverse (note) di cDNA;
-grafico: asse x --> LOG n°copie cDNA iniziale x ogni ciclo
asse y --> Ciclo Soglia (CT) x ogni ciclo
Quando andrò ad analizzare l'RNA estratto lo retrotrascriverò, farò Real Time e poi andro a vedere il ciclo soglia di quest'amplificazione a quale numero di copie corrisponde sulla retta di taratura.
Spero di non aver detto baggianate ma accetto di buon grado tutte le correzioni!!!!
GRAZIE IN ANTICIPO!!!!
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