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enzima
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2 Messaggi

Inserito il - 07 giugno 2011 : 16:51:02

ciao a tutti iscritta da poco, avrei bisogno di aiuto...ho indotto l'autofagia in cellule HeLa utilizzando del terreno privo di siero e amminoacidi, ho fatto un wb per controllare l'andamento della proteina LC3 (marcatore dell'autofagia), ho avuto il segnale. In seguito ho rifatto più volte l'esperimento, cambiando diversi parametri, ma non ho avuto più alcun segnale...non so da cosa possa dipendere.
Grazie

jazz84
Nuovo Arrivato

19 Messaggi

Inserito il - 07 giugno 2011 : 17:34:00

Ciao,
anch'io sono nuova e lavoro da poco con linee cellulari immortalizzate. La tua domanda mi ha molto incuriosito perchè ultimamente,ho avuto lo stesso problema.
La causa era che le mie cellule avevano subito troppi passaggi e questo aveva modificato la loro risposta al trattamento; per farla breve ho riscongelato una nuova aliquota

Non so se questo può aiutarti,
let me know
Ciao

enzima
Nuovo Arrivato

2 Messaggi

Inserito il - 08 giugno 2011 : 12:28:56

ho fatto diverse prove tra cui scongelare una nuova aliquota di cellule ma non ho risolto nulla...il segnale è praticmente scomparso...posso chiederti che tipo di anticorpo usi e a che diluizione?