Ciao a tutti, dovrei clonare un intero genoma virale per studiare in vitro un virus non coltivabile in colture cellulari ma non ho esperienza in merito.. non credo infatti di poter usare il TA cloning (l'unico che conosco) perchè poi devo poter nuovamente tagliare il genoma dal vettore per trasfettarlo. pensavo quindi di fare il clonaggio con enzimi di restrizione, ma come sceglierli? come fare in modo che digeriscano solo le estremità e non taglino dentro la sequenza?
grazie in anticipo a tutti coloro che vorranno darmi suggerimenti o protocolli su come operare!!!