sequenziamento e mutazioni puntiformi

Forum

Registrati Discussioni Recenti Preferiti Utenti Cerca Regolamento RSS Statistiche

Utilità

I libri
consigliati:

Marie Curie
Susan Quinn

Biochimica. Con aspetti molecolari della biologia cellulare
Reginald Garrett, Charles Grisham

Biologia
Autori Vari

Altri Libri

Nome Utente:	Password:
Riconoscimi automaticamente

Tutti i Forum

MolecularLab

Biologia Molecolare

sequenziamento e mutazioni puntiformi

Nuova Discussione

Nuovo Sondaggio

Rispondi

Aggiungi ai Preferiti

Cerca nelle discussioni

Risorse di Biologia Molecolare:

Didattica

Blog Inside the Cell

Protocolli

Siti di Biologia Molecolare e Tecniche

Quiz

Ultime notizie

Aggiungi i tag

Quanto � utile/interessante questa discussione:

Autore

Discussione

l�
Utente Junior

565 Messaggi

Inserito il - 14 aprile 2010 : 19:11:48

ciao a tutti! scusate, magari la domanda � scema.....se dopo un clonaggio mando il mio plasmide a sequenziare e continuo ad ottenere delle mutazioni puntiformi nella sequenza, quale pu� essere la causa?

Laracroftit
Nuovo Arrivato

Citt�: Sassari

37 Messaggi

Inserito il - 14 aprile 2010 : 19:15:41

E' appena successo anche a me... Quando hai fatto la PCR per il frammento da clonare, quanti cicli hai fatto? perche' piu' cicli fai e maggiore e' la probabilita' di avere errori.
E un'altra cosa importante e' la Taq che hai utilizzato. Di solito per clonaggi uso la Pfx,ma dipende comunque da cosa stai facendo...

"I want to know God's thoughts...
...the rest are details."
(Albert Einstein)

SpemannOrganizer
Utente

Citt�: Los Angeles

955 Messaggi

Inserito il - 14 aprile 2010 : 20:24:38

Io ti suggerirei di far sequenziare anche il plasmide da cui hai ottenuto il tuo costrutto (se per esempio hai richiesto il gene ad un altro lab) e confrontare la sequenza... A volte le variazioni di sequenza sono dovute a polimorfismi che puoi trovare nei database

l�
Utente Junior

565 Messaggi

Inserito il - 15 aprile 2010 : 10:37:54

grazie! il problema non l'ho avuto io, ma una mia amica. le chieder� le informazioni che mi avete suggerito! grazie mille!