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Lavinia94
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34 Messaggi
Inserito il - 21 maggio 2015 : 09:42:02  Mostra Profilo Invia a Lavinia94 un Messaggio Privato  Rispondi Quotando
Per la selezione delle cellule che hanno incorporato il plasmide ricombinante a che serve il gene lacI? (su lacZ' ci sono, ma lacI a che serve??)

Thermocycler
Nuovo Arrivato


Prov.: vr
Città: verona


14 Messaggi
Inserito il - 21 maggio 2015 : 10:15:28  Mostra Profilo  Visita l'Homepage di Thermocycler Invia a Thermocycler un Messaggio Privato  Rispondi Quotando
codifica per la proteina repressore che lega la sequenza operatore.
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Lavinia94
Nuovo Arrivato



34 Messaggi
Inserito il - 21 maggio 2015 : 13:26:06  Mostra Profilo Invia a Lavinia94 un Messaggio Privato  Rispondi Quotando
Citazione:
Messaggio inserito da Thermocycler

codifica per la proteina repressore che lega la sequenza operatore.

ma LacI (inibitore)è espresso costitutivamente e quindi lacZ viene sempre represso in quanto X-Gal ha la funzione di substrato della betagalattosidasi, ma il suo metabolismo non produce un repressore dell'inibitore.... quindi non si potrebbero distinguere colonie blu bianco?!? come funziona?!?!
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Thermocycler
Nuovo Arrivato


Prov.: vr
Città: verona


14 Messaggi
Inserito il - 22 maggio 2015 : 23:31:52  Mostra Profilo  Visita l'Homepage di Thermocycler Invia a Thermocycler un Messaggio Privato  Rispondi Quotando
una cosa per volta:

LacI viene espresso costitutivamente ed in assenza di allolattosio o IPTG inibisce la trascrizione legando LacO(operatore).
In presenza un attivatore la proteina repressore dissocia dal sito LacO permettendo l'espressione del gene.

LacZ esprime per beta galattosidasi, un enzima che può utilizzare x-gal come substrato.

quindi:
-se lacZ viene espresso avrò una colonia blu, che testimonia la presenza del plasmide
-se lacZ non viene espresso avrò una colonia bianca
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Lavinia94
Nuovo Arrivato



34 Messaggi
Inserito il - 23 maggio 2015 : 14:22:32  Mostra Profilo Invia a Lavinia94 un Messaggio Privato  Rispondi Quotando
Citazione:
Messaggio inserito da Thermocycler

una cosa per volta:

LacI viene espresso costitutivamente ed in assenza di allolattosio o IPTG inibisce la trascrizione legando LacO(operatore).
In presenza un attivatore la proteina repressore dissocia dal sito LacO permettendo l'espressione del gene.

LacZ esprime per beta galattosidasi, un enzima che può utilizzare x-gal come substrato.

quindi:
-se lacZ viene espresso avrò una colonia blu, che testimonia la presenza del plasmide
-se lacZ non viene espresso avrò una colonia bianca





ma il plasmide contiene anche lacI, che inibisce l'espressione di lacZ...quindi le colonie dovrebbero esere tutte bianche
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