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Autore Discussione  

Rsr
Nuovo Arrivato


Città: Modena


15 Messaggi
Inserito il - 04 giugno 2011 : 15:19:40  Mostra Profilo  Visita l'Homepage di Rsr Invia a Rsr un Messaggio Privato  Rispondi Quotando
Qualcuno saprebbe dirmi perchè quando devo ingegnerizzare una proteina di fusione tra i due geni metto una sequenza IRES ?

con uno schema del genere:

Promotore-cDNA1-IRES-cDNA2

zerhos
Utente Junior

ZERHOS

Prov.: Pisa
Città: Pisa


421 Messaggi
Inserito il - 05 giugno 2011 : 16:50:49  Mostra Profilo  Visita l'Homepage di zerhos  Invia a zerhos un messaggio ICQ Invia a zerhos un Messaggio Privato  Rispondi Quotando
Attento questo costrutto non ti da una proteina di fusione, ma una sequenza bicistronica.
Una proteina di fusione è questa:

>----Promotore-cDNA1cDNA2-PA----<

In questo caso elimini il codone di stopo di cDNA1 e inserisci in frame cDNA2, ottenendo così una proteina di fusione; ad esempio una proteina fusa alla GFP oppure fusa ad un dominio di localizzazione alla membrana ecc.

mentre:
>----Promotore-cDNA1-PA/IRES/cDNA2-PA-----<

Hai 2 sequenze di trascrizione regolate sotto il medesimo promotore. In questo caso le sequenze colocalizzano, ma non sono fuse.

per la sequenza IRES vedi quì:
http://en.wikipedia.org/wiki/Internal_ribosome_entry_site
"l'unica differenza tra me e un pazzo è che io non sono pazzo!"
Salvador.Dalì
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Rsr
Nuovo Arrivato


Città: Modena


15 Messaggi
Inserito il - 05 giugno 2011 : 17:09:59  Mostra Profilo  Visita l'Homepage di Rsr Invia a Rsr un Messaggio Privato  Rispondi Quotando
Grazie zerhos,

mi sei stato d'aiuto
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