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Discussione

jovy
Nuovo Arrivato

102 Messaggi

Inserito il - 03 dicembre 2011 : 12:42:33

Sto lavorando a dei dosaggi colorimetrici (450nm) di una proteina tramite un kit commerciale.
Ho costruito la retta di calibrazione... (ho costruito la retta con excel solo con i primi punti dei miei standard, perch� perderei la correlazione lineare inserendo gli altri-->a questo proposito qualcuno sa indicarmi un programma che mi consente di costruire una curva e non una retta e che mi dia i valori per i miei campioni automaticamente??)
Ho in seguito letto i miei campioni tal quali e diluiti 1:2.
La cosa strana � che le due letture non mi danno assolutamente valori sovrapponibili.
Questi sono i valori degli standard (a sinistra le concentrazioni a destra le Abs):
0 0,06
15 0,16
80 0,515
250 1,2
500 1,9
1000 2,6
Queste sono le assorbanze dei miei campioni diluiti 1:2:
1 0,182
2 0,334
3 0,275

e queste dei campioni tal quali:
1 0,245
2 0,449
3 0,38

Qualcuno pu� aiutarmi??
Grazie!

Martin.diagnostica
Utente Attivo

1582 Messaggi

Inserito il - 03 dicembre 2011 : 15:39:03

Citazione:
Messaggio inserito da jovy

Sto lavorando a dei dosaggi colorimetrici (450nm) di una proteina tramite un kit commerciale.
Ho costruito la retta di calibrazione... (ho costruito la retta con excel solo con i primi punti dei miei standard, perch� perderei la correlazione lineare inserendo gli altri-->a questo proposito qualcuno sa indicarmi un programma che mi consente di costruire una curva e non una retta e che mi dia i valori per i miei campioni automaticamente??)

Guarda la linearit� � accettabile, personalmente eliminerei l'ultimo standard e lavorerei sul range di linearit� 0-500 tanto le OD dei tuoi campioni sono tutte minori di 1

Immagine:

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jovy
Nuovo Arrivato

102 Messaggi

Inserito il - 04 dicembre 2011 : 19:19:24

grazie!!
Comunque si ho ragionato allo stesso modo per costruire la retta...
Il problema � che usando la retta i duplicati sui miei campioni non sono sovrapponibili!

Martin.diagnostica
Utente Attivo

1582 Messaggi

Inserito il - 04 dicembre 2011 : 21:22:55



 	dil �		ug	ug     delta
1	0,182	0,245	98	66	32
2	0,334	0,449	179	121	59
3	0,275	0,38	148	102	46

si fanno un p� schifo queste misure prova ad inserire un 3 punto cosi poi fai la media, qualche pipetta potrebbe anche essere starata