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laRoby
Nuovo Arrivato
Prov.: Barcelona
Città: Barcelona
4 Messaggi |
 Inserito il - 26 settembre 2008 : 12:16:16
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Ciao a tutti! avrei bisogno di un consiglio! sto usando una linea cellulare di hepatociti umani (HEPG2), peró ho riscontrato problemi al momento di coltivarla: hanno la tendenza a formare tessuti e non crescono in monostrato. Sapete per caso il terreno di coltura piú indicato e le condizioni migliori per mantenerle? grazie mille
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amicia
Nuovo Arrivato
24 Messaggi |
Inserito il - 26 settembre 2008 : 13:13:29
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La crescita non a monostrato è propria delle cellule hepG2 (ricorda che hanno una derivazione epatocitaria e quindi tendono a crescere in tre dimensioni), non ti preoccupare, per avere una coltura il più possibile uniforme devi risospendere molto bene la miscela di partenza e scuotere con movimento sussultorio la flask o le piastre una volta che hai seminato.
Per i mezzi, poichè sono cellule poco esose, puoi utilizzare svariati mezzi, io le ho provate con:
DMEM + 10 o 5% di siero, oppure
MEM + 5% siero + 1% NEAA + 1% vitamin + 1% Glutammina, oppure
RPMI 1640 + 5-10% siero
Decidi poi tu se aggiungere la PS o altri antibiotici.
Le condizioni in incubatore sono le classiche, ovvero 37°C e 5% CO2.
Spero di esserti stato utile |
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laRoby
Nuovo Arrivato
Prov.: Barcelona
Città: Barcelona
4 Messaggi |
Inserito il - 26 settembre 2008 : 13:20:16
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Citazione:
Messaggio inserito da amicia
La crescita non a monostrato è propria delle cellule hepG2 (ricorda che hanno una derivazione epatocitaria e quindi tendono a crescere in tre dimensioni), non ti preoccupare, per avere una coltura il più possibile uniforme devi risospendere molto bene la miscela di partenza e scuotere con movimento sussultorio la flask o le piastre una volta che hai seminato.
Per i mezzi, poichè sono cellule poco esose, puoi utilizzare svariati mezzi, io le ho provate con:
DMEM + 10 o 5% di siero, oppure
MEM + 5% siero + 1% NEAA + 1% vitamin + 1% Glutammina, oppure
RPMI 1640 + 5-10% siero
Decidi poi tu se aggiungere la PS o altri antibiotici.
Le condizioni in incubatore sono le classiche, ovvero 37°C e 5% CO2.
Spero di esserti stato utile
Grazie mille, mi sei stato di aiuto! proverò a fare come di hai detto. ti farò sapere! un saluto |
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