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Gaia84
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8 Messaggi

Inserito il - 06 febbraio 2009 : 10:36:39

premetto che sono un ambientale... prima di farvi gridare allo "scandalo" per la domanda che sto per porvi.
cosa significa che utilizzo il pvx nella produzione di proteine eterologhe?
sfruttando la GFP riesco a identificare e localizzare a livello subcellulare la pvx-gfp... e dopo?
1-sostituzione gfp con il gene di interesse
2-estrazione di proteine da foglie infette
3-purificazione della proteina di interesse con metodologie biochimiche
Illuminatemi!!

chick80
Moderatore

Citt�: Edinburgh

11491 Messaggi

Inserito il - 06 febbraio 2009 : 12:40:45

Non ho ben capito cosa vuoi sapere...

PVX = potato virus X, immagino sia semplicemente un vettore usato per cellule vegetali

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Gaia84
Nuovo Arrivato

8 Messaggi

Inserito il - 06 febbraio 2009 : 13:54:46

se ho ben capito:
utilizzo il pvx come vettore per le cellule vegetali inserendo anche il gfp per approfiitare della lumincesnza di questa proteina ed inoltre inserisco anche il gene di mio intersse.
la gfp lo inserisco semplicemente per la luminiscenza e per localizarre le proteine infette dalla pianta
il pvx mi permette l'ingresso nella pianta
estraggo le proteine le purifico ed avr� ottenuto la produzzione di proteine eterologhe alla pianta.

sperando che sia esatto... la produzione di proteine eterologhe a cosa potrebbe servire?
potresti farmi un esempio concreto... mi rendo conto che per dei molecolari tale domanda sia banale... ma studiare la metodologia senza contestualizzarla nella realt� mi riesce difficile ed astratto...

Mille grazie!!

chick80
Moderatore

Citt�: Edinburgh

11491 Messaggi

Inserito il - 06 febbraio 2009 : 15:09:26

Beh, ci sono tantissime possibili applicazioni.
Ad es. si utilizza spesso questa tecnica per studiare cosa fa la tua proteina. La esprimi in una cellula che non ce l'ha normalmente in modo da poter controllare pi� facilmente il suo comportamento.

Oppure puoi utilizzare la tua cellula come "fabbrica" di produzione della tua proteina. E' quello che si fa con l'insulina che viene prodotta facendola esprimere in E. Coli

Nelle piante si possono ad es. far produrre antibiotici peptidici avendo cos� un modo semplice di somministrare e trasportare un prodotto altrimente molto facilmente degradabile.

Sempre nelle piante puoi esprimere proteine che le rendono immuni a determinati parassiti o pi� resistenti al freddo etc etc

Oppure puoi semplicemente far esprimere GFP in modo che sia localizzata in determinati organelli per studiarne la morfologia o la distribuzione in diverse situazioni.

Insomma, ci sono mille casi! Sinceramente non ti so dire nello specifico nulla di pvx, non ho mai lavorato con piante, comunque l'idea � questa.

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Gaia84
Nuovo Arrivato

8 Messaggi

Inserito il - 06 febbraio 2009 : 19:10:14

Grazie!!!!

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