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cricri82
Nuovo Arrivato
2 Messaggi |
 Inserito il - 24 febbraio 2009 : 11:17:41
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ciao a tutti!
qualcuno di voi conosce un protocollo di estrazione di proteine totali da tessuto congelato? mi servirebbe la ricetta del Lisi Buffer...grazie a tutti
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byo_gio
Nuovo Arrivato
Prov.: MI
Città: Milano
66 Messaggi |
Inserito il - 02 marzo 2009 : 19:56:47
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| ne esistono tantissimi... dipende da che tessuto usi e in che compartimento cellulare si trovano le proteine che devi studiare... ti consiglio un po' di ricerca bibliografica. |
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jeje
Nuovo Arrivato
52 Messaggi |
Inserito il - 02 marzo 2009 : 20:01:05
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| devi farci proteomica? |
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H2O
Nuovo Arrivato
32 Messaggi |
Inserito il - 03 marzo 2009 : 18:02:37
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Citazione:
Messaggio inserito da byo_gio
ne esistono tantissimi... dipende da che tessuto usi e in che compartimento cellulare si trovano le proteine che devi studiare... ti consiglio un po' di ricerca bibliografica.
Che aiuto è? mah....
cricri guarda se ti può essere d'aiuto questo:
.PBS (8g NaCl, 0.2g KCl, 1.44g Na2HPO4, 0.24g KH2PO4 in
1000ml H2O, pH 7.4)
.Lysis buffer (50 mM Tris-HCl pH 8, 150 mM NaCl, 1% NP-40)
.Fluoruro di fenilmetansulfonile (50mM PMSF in isopropanolo)
.Inibitori delle proteasi (100x) (1ug/ml Leupeptina, Aprotinina, e
Pepstatina)
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chick80
Moderatore
Città: Edinburgh
11491 Messaggi |
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Eleo
Nuovo Arrivato
Prov.: Pavia
89 Messaggi |
Inserito il - 10 marzo 2009 : 11:35:03
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Urea 7 M
Tiourea 2 M
Chaps 4%
Ditiotreitolo (DTT) 30 mM
questo è il tampone di lisi che usavo io per biopsie congelate per estrarre le proteine che poi precipitavo con TCA quantificavo e usavo per isoelettrofocusing e 2D-PAGE. |
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proteomica
Didattica
