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Autore

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cricri82
Nuovo Arrivato

2 Messaggi

Inserito il - 24 febbraio 2009 : 11:17:41

ciao a tutti!

qualcuno di voi conosce un protocollo di estrazione di proteine totali da tessuto congelato? mi servirebbe la ricetta del Lisi Buffer...grazie a tutti

byo_gio
Nuovo Arrivato

Prov.: MI
Citt�: Milano

66 Messaggi

Inserito il - 02 marzo 2009 : 19:56:47

ne esistono tantissimi... dipende da che tessuto usi e in che compartimento cellulare si trovano le proteine che devi studiare... ti consiglio un po' di ricerca bibliografica.

jeje
Nuovo Arrivato

52 Messaggi

Inserito il - 02 marzo 2009 : 20:01:05

devi farci proteomica?

H2O
Nuovo Arrivato

32 Messaggi

Inserito il - 03 marzo 2009 : 18:02:37

Citazione:
Messaggio inserito da byo_gio

ne esistono tantissimi... dipende da che tessuto usi e in che compartimento cellulare si trovano le proteine che devi studiare... ti consiglio un po' di ricerca bibliografica.

Che aiuto �? mah....
cricri guarda se ti pu� essere d'aiuto questo:

.PBS (8g NaCl, 0.2g KCl, 1.44g Na2HPO4, 0.24g KH2PO4 in
1000ml H2O, pH 7.4)

.Lysis buffer (50 mM Tris-HCl pH 8, 150 mM NaCl, 1% NP-40)

.Fluoruro di fenilmetansulfonile (50mM PMSF in isopropanolo)

.Inibitori delle proteasi (100x) (1ug/ml Leupeptina, Aprotinina, e
Pepstatina)

chick80
Moderatore

Citt�: Edinburgh

11491 Messaggi

Inserito il - 03 marzo 2009 : 18:17:16

Concordo con byo_gio, dipende dal tessuto.
Io per il cervello usavo questo
http://www.molecularlab.it/protocolli/protocol.asp?id=10

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Eleo
Nuovo Arrivato

Prov.: Pavia

89 Messaggi

Inserito il - 10 marzo 2009 : 11:35:03

Urea 7 M
Tiourea 2 M
Chaps 4%
Ditiotreitolo (DTT) 30 mM
questo � il tampone di lisi che usavo io per biopsie congelate per estrarre le proteine che poi precipitavo con TCA quantificavo e usavo per isoelettrofocusing e 2D-PAGE.