sakura86
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Inserito il - 25 febbraio 2009 : 19:51:52
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Salve, devo consegnare lo svolgimento di alcuni problemi al mio professore la prox settimana, dato che non ho la sicurezza di averli fatti bene e alcuni proprio non sono in grado di svolgerli, vorrei chiedere a voi esperti, se mi potete dare una mano a fare una bella figura anche se non avete il tempo di scrivermi lo svolgimento mi basterebbe anche solo una piccola spiegazione per capire meglio GRAZIE MILLE A TUTTI
1) Il dosaggio di un estratto cellulare per l’enzima fosfatasi alcalina ha dato come risultato delta A/delta t = 0.1 Considerato che il delta Epsilon=18 mM^-1 cm^-1 a 410 nm nelle condizioni di saggio e che ho utilizzato 15 µl di estratto in un volume finale di 0,5 ml, calcolare le Unità enzimatiche per millilitro contenute nell’estratto.
2) Una curva di taratura per la determinazione colorimetrica della concentrazione di proteine con il metodo di Bradford ha dato i seguenti risultati: BSA mg/ml Assorbanza a 595 nm 0,001 0,022 0,002 0,050 0,003 0,075 0,004 0,100 0,005 0,125 0,006 0,150 0,007 0,172 Riportare i dati su un grafico utilizzando carta millimetrata Un campione a concentrazione ignota (X) è stato diluito 50 volte per essere saggiato con lo stesso metodo e le assorbanze ottenute per le prove in doppio sono state le seguenti: 0,012 e 0,014 Calcolare la concentrazione di proteine nel campione (X).
3) Devo preparare 500 ml di una soluzione del nucleoside adenosina 1 mM, considerato che il nucleoside ha un peso molecolare di 267,2, quanta polvere devo pesare? Considerato che l’adenosina a 254 nm a 25 °C e pH 7 ha epsilon = 14 mM^-1 cm^-1, quante volte dovrò diluire la soluzione per ottenere una assorbanza di 0,8 nelle stesse condizioni?
4) Ho preparato un estratto cellulare che ritengo contenere circa 10 mg/ml di proteine, devo comunque dosare il contenuto esatto. Considerando che userò il metodo Bradford quante volte devo diluire il mio campione per poter utilizzare la curva di taratura descritta nell’esercizio 2? .
5) Una proteina monomerica contenente il gruppo eme ed in grado di legare reversibilmente l’ossigeno, mostra una P50 di 15 Torr. A quale pressione parziale di ossigeno si può considerare satura al 99%?
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