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miky76
Utente Junior



126 Messaggi

Inserito il - 20 marzo 2009 : 16:17:57  Mostra Profilo  Visita l'Homepage di miky76 Invia a miky76 un Messaggio Privato  Rispondi Quotando
nel mio lab fanno sonde con RNA Polymerase T3

ora stanno facendo una nuova sonda con RNA Polymerase SP6
facendo lo stesso protocollo e non viene nulla

naturalmente quando qualcosa non funziona il capo passa a me la patata bollente!

qualcuno ha mai lavorato con SP6?
ho controllato il protocollo e mi sembra ok...
forse SP6 funziona peggio o bisogna fare qualcosa di particolare per farla funzionare

non so....
da lunedi inizio a dedicarmi a sto problema
ma se nel frattempo qualcuno avesse dell'esperienza con SP6

grazie

Botry
Nuovo Arrivato


Città: Padova


2 Messaggi

Inserito il - 25 febbraio 2011 : 13:10:54  Mostra Profilo  Visita l'Homepage di Botry Invia a Botry un Messaggio Privato  Rispondi Quotando
SP6 ha una resa più bassa di T3 e T7, ma dovrebbe funzionare bene. A me funziona bene almeno. Sicuro che non ci siano problemi sull'enzima? Che non sia scassato.
Controlla anche i dNTPs.
Se fai sonde ad RNA che siano quelli giusti. Ovvero che non siano dNTPs, non devono essere deossi.
Alle volte quelli per RNa li indicano come rATP, rGTP etc o senza nulla ATP, GTP etc... Se sono dATP, dGTP etc sono sbagliati e non ti verrà nulla.
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