Autore |
Discussione |
|
Evil
Nuovo Arrivato
67 Messaggi |
Inserito il - 26 aprile 2009 : 18:07:27
|
come si potrebbe usare CRE per fare una delezione di un gene per esempio quello della connexina 3 in un tessuto specifico.. come specificità sò che il gene rx1 è espresso solo nel tessuto dove voglio fare la delezione..
Grazie
|
|
|
chick80
Moderatore
    

Città: Edinburgh
11491 Messaggi |
Inserito il - 26 aprile 2009 : 18:23:07
|
Innanzitutto dovresti procurarti degli animali "connessina 3 - floxed" ovvero, animali in cui è stato fatto un KO del gene della connessina ed un knock-in di un costrutto:
loxP-connessina 3-loxP
Gli animali floxed solitamente sono uguali ai wild type ed esprimono la connessina (o il gene "floxato") normalmente. A questo punto incroci questi animali con una linea di rx1-Cre che esprimono Cre sotto il controllo del promotore di rx1 (o di quello che vuoi tu). Anche questi animali solitamente sono uguali ai wild type.
Nella progenie la connessina 3 verrà excisa da Cre, ma solo nel tessuto specifico, in quanto Cre non è presente da altre parti.
|
Sei un nuovo arrivato? Leggi il regolamento del forum e presentati qui
My photo portfolio (now on G+!) |
 |
|
Evil
Nuovo Arrivato
67 Messaggi |
Inserito il - 27 aprile 2009 : 08:23:53
|
chiarissimo, molte grazie! |
 |
|
elly_
Utente Junior


400 Messaggi |
Inserito il - 27 aprile 2009 : 13:26:52
|
un'altra cosa che si potrebbe fare, è allestire una coltura primaria dal tessuta d'interesse del topo flox-connexin-flox e poi infettarlo con un virus contenente il costrutto cre. |
 |
|
|
Discussione |
|