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pepy
Nuovo Arrivato
15 Messaggi |
Inserito il - 01 luglio 2009 : 12:28:46
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Ciao a tutti,spero mi possiate aiutare!Ho l'esame di biologia molecolare e non riesco a risp a questa domanda:ho clonato il cDNA della proteina X,espressa dai fibroblasti.alcuni dati sperimentali suggeriscono che questa proteina sia coinvolta nel controllo della duplicazione cell.Per verificare questa ipotesi volete ridurre l'espressione della proteina. - pensa che utilizzare RNA interferenti possa essere una strategia da adottare?perchè? - quali metodi conosce per produrre artificialmente RNA interferenti? in che modo pensa di introdurli nelle cell? - quali controlli pensa sia necessario adottare nella pianificazione dell'esperimanto? - come pensa di verificare l'abbattimento dell'espressione della proteina?
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miky76
Utente Junior

126 Messaggi |
Inserito il - 01 luglio 2009 : 14:11:55
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possibile che voi studenti chiedete sempre RNAi? i prof o i libri non ve la spiegano?
esistono milioni di articoli in pubmed molti sono rewiev
cmq si che puoi usare RNAi per ridurre l'espressione della proteina ed e' una strategia che puoi adottare perche' se la proteina e' implicata nella duplicazione cellulare e tu non la fai espreimere probabilmente le cellule non si duplicano e tu dimostri questa implicazione
poi esistono diversi RNAi siRNA shRNA miRNA
vai su i libri o internet o pub med e leggi le differenze
come introfurli nelle cellule? mah di solito si usa lipofectamina ma esistono vari modi per transfettare cellule non so quali metodi il tuo prof ti ha spiegato vorra' che gli elenchi e spighi quelli
e per l'ultima donanda puoi fare un western o una immuno per vedere se la proteina non e' espressa e io metterai anche l'analisi dell'RNA per verificare se la tua RNAi e' funzionale anche a livello di RNA

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pepy
Nuovo Arrivato
15 Messaggi |
Inserito il - 01 luglio 2009 : 16:52:32
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Grazie mille. Davvero gentile!mi hai davvero dato un aiuto importante |
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