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amelietta
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21 Messaggi

Inserito il - 20 novembre 2009 : 18:00:35  Mostra Profilo  Visita l'Homepage di amelietta Invia a amelietta un Messaggio Privato  Rispondi Quotando
Ciao, qualcuno sa indicarmi la concentrazione ideale alla quale conservare il DNA per lunghi periodi?
grazie grazie

farmacologia
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Ignorante



100 Messaggi

Inserito il - 20 novembre 2009 : 20:47:11  Mostra Profilo  Visita l'Homepage di farmacologia Invia a farmacologia un Messaggio Privato  Rispondi Quotando
Non credo esista una regola certa, una quantità precisa o un tempo minimo o massimo di conservazione.
io tendo a conservare ad una [] di 100 ng/microlitro, sia DNA che RNA.
per quest'ultimo ho più difficoltà, nel senso che dopo circa un anno di -80°C l'ho trovato alquanto degradato (osservandolo su gel), ma ho provato lo stesso a RT ed è andato tutto, relativamente bene.
per il DNA, in frigo ne conservo campioni da circa un anno o più.
Quello che credo possa influire negativamente sono le operazioni di scongelamento/congelamento, per cui ho adottato il sistema delle micro-aliquote.
se però in quello che faccio trovate dei punti critici, fatelo sapere anche a me, così da adottare le cosiddette azioni correttive.
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amicia
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24 Messaggi

Inserito il - 25 novembre 2009 : 12:41:23  Mostra Profilo  Visita l'Homepage di amicia Invia a amicia un Messaggio Privato  Rispondi Quotando
Sinceramente mi sembra che come fa farmacologia sia la soluzione migliore: ossia le microaliquote stoccate a -80°C per RNA e a -20°C per DNA. Non so, potresti pensare di utilizzare quei composti che proteggono gli acidi nucleici dalla degradazione (ne conosco uno prodotto dalla Ambion, ma di sicuro non è il solo), però non so quanto siano realmente efficaci, forse qualcuno nel forum ha esperienza di questo tipo?
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