Metilazione del DNA su gel di p.acrilammide

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Pierdomenico
Nuovo Arrivato

Prov.: L'Aquila
Citt�: L'Aquila

11 Messaggi

Inserito il - 05 marzo 2010 : 12:24:12

Ciao a tutti.. vi chiedo una mano per quanto riguarda la separazione di amplificati di DNA metilati (metodo del sodio bisulfito) su gel di poliacrilammide.
1)La poliacrilammide che rapporto deve avere? Va bene la 29:1?
2)Sapete dirmi esattamente la composizione del gel che devo preparare?
Io ho usato la ricetta x l'SDS-PAGE ma senza l'SDS:
Poliacrilammide, TRIS-HCl(ph8.8 R e 6.8 S), TEMED e APS.
Qualcuno mi ha detto che ci va anche l'UREA??!! E' vero??'
3)Per il loading-blu va bene il blu di bromofenolo in glicerolo che uso per l'elettroforesi in agarosio?
Aiutatemi... e vi ringrazio tutti per l'attenzione!!!
Ciao

GFPina
Moderatore

Citt�: Milano

8408 Messaggi

Inserito il - 05 marzo 2010 : 15:45:29

Non ho molto tempo ora ma se cerchi nel forum ho messo la ricetta in qualche post, cerca polyacrilamnide DNA o qualcosa del genere.

Pierdomenico
Nuovo Arrivato

Prov.: L'Aquila
Citt�: L'Aquila

11 Messaggi

Inserito il - 05 marzo 2010 : 16:20:55

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