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 CLIP (cross-linking and immuno precipitation)
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mifa87
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12 Messaggi

Inserito il - 21 aprile 2010 : 22:35:16  Mostra Profilo  Visita l'Homepage di mifa87 Invia a mifa87 un Messaggio Privato  Rispondi Quotando
Buonasera a tutti....spero che qualcuno possa aiutarmi riguardo un passaggio della tecnica CLIP , che serve ad identificare le interazioni tra RNA e proteine, come la SELEX, solo che in più ci da anche informazioni sulla sequenza di legame dell'RNA stesso... quello che non capisco è che, dopo aver fatto reagire l'anticorpo per quella specifica proteina (quella che ci interessa) che lega l'RNA, noi aggiungiamo sulla sequenza di RNA un frammento, con la RNA ligasi, di 10-12 nucleotidi, che dovrà servire come primer forward per la fase finale, che è la PCR. Ma come facciamo a mettere un primer su una sequenza che non conosciamo? e cosi anche quando mette quello reverse, dopo 2 o 3 passaggi...
help me.....
grazie...

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