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superilala
Nuovo Arrivato
Città: Rotterdam
30 Messaggi |
 Inserito il - 30 giugno 2010 : 13:48:27
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Mi chiedevo..secondo voi e' possibile preparare il terreno per le cellule addizionato di G418 (gentamicina) e conservarlo a 4C?..in lab mi hanno detto di prepararlo fresco ogni volta (sto selezionando mille cloni ed e' una bella scocciatura!) pero' mi sembra strano che sia cosi instabile..voi come vi regolate?
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SpemannOrganizer
Utente
Città: Los Angeles
955 Messaggi |
Inserito il - 30 giugno 2010 : 14:30:47
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non conosco l'emivita della gentamicina, però l'emivita degli antibiotici in generale decresce sensibilmente con l'aumentare della temperatura. D'alro canto, noi usiamo soluzioni gentamicna/mmr (per Xenopus laevis) che una volta preparate vengono tenute a 16 °C (comunque non per molto, pochi giorni).
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RM
Nuovo Arrivato
115 Messaggi |
Inserito il - 30 giugno 2010 : 14:33:00
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Io preparo lo stock sciogliendolo in PBS, lo aliquoto e lo tengo a -20°C. Al bisogno, scongelo una o più aliquote e lo aggiungo al terreno, che cambio ogni 3-4 giorni.
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Dionysos
Moderatore
Città: Heidelberg
1913 Messaggi |
Inserito il - 01 luglio 2010 : 00:52:16
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Il G418 non è gentamicina, ma genetecina.
http://en.wikipedia.org/wiki/G418
Io per i cloni ne preparavo ogni volta una bottiglia 500 ml
e conservavo a 4°C, e non ho avuto problemi di selezione.
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Volere libera : questa é la vera dottrina della volontà e della libertà
(F.W. Nietzsche)
Less Jim Morrison, more Sean Morrison!
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paolo865
Utente Junior
Prov.: Como
Città: Olgiate Comasco
262 Messaggi |
Inserito il - 01 luglio 2010 : 07:44:13
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| Io di solito preparo delle aliquote da 50 mL con G418 ogni qual volta lavoro sotto cappa e se me ne resta un po' lo conservo a 4° e lo uso la volta precedente...non ho mai avuto problemi..però considera che lo uso al massimo nel giro di 3-4 giorni. |
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G418..stabilita'..
Didattica
