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aleinc
Nuovo Arrivato
2 Messaggi |
 Inserito il - 24 settembre 2010 : 14:58:27
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ciao...
non sono riuscita a sviluppare dalla membrana di nitrocellulosa al fil con il reagente ECL, nessun reagente è scaduto anticorpo primario, secondario, reagente ecl e reagenti di sviluppo...
potrebbe essere dovuto al fatto che ho incubato tutta la notte a 20 gradi invece che 4?
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immetella
Nuovo Arrivato
Prov.: Pescara
Città: Pescara
32 Messaggi |
Inserito il - 24 settembre 2010 : 15:15:10
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Secondo me potresti riprovare l'incubazione a 4°C...ma è la prima volta che usi questo anticorpo o lo usavi già??? |
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aleinc
Nuovo Arrivato
2 Messaggi |
Inserito il - 24 settembre 2010 : 15:26:59
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in effetti quando ho incubato a 4 ° ha funzionato... ma è davvero così importante la temperatura? potrei provare ad incubate 1 ora a temperatura ambiente? |
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dukenukem
Nuovo Arrivato
Prov.: TS
Città: Trieste
1 Messaggi |
Inserito il - 25 settembre 2010 : 16:56:58
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| L'incubazione overnight a 4 gradi viene fatta per evitare aspecificità, altrimenti si usa fare 60 o 90 minuti a RT. Inoltre ti consiglierei di usare al posto dell'ECL il femto super signal della Thermo per avere un buon segnale anche nel caso in cui questo sia debole. |
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ale88n
Nuovo Arrivato
Prov.: rm
Città: roma
51 Messaggi |
Inserito il - 04 ottobre 2010 : 12:49:17
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| sicuramente è colpa del incubazione a 20 riprova a +4 |
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Western blotting
Didattica
