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aleinc
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2 Messaggi

Inserito il - 24 settembre 2010 : 14:58:27  Mostra Profilo  Visita l'Homepage di aleinc Invia a aleinc un Messaggio Privato  Rispondi Quotando
ciao...
non sono riuscita a sviluppare dalla membrana di nitrocellulosa al fil con il reagente ECL, nessun reagente è scaduto anticorpo primario, secondario, reagente ecl e reagenti di sviluppo...
potrebbe essere dovuto al fatto che ho incubato tutta la notte a 20 gradi invece che 4?

immetella
Nuovo Arrivato

Dory

Prov.: Pescara
Città: Pescara


32 Messaggi

Inserito il - 24 settembre 2010 : 15:15:10  Mostra Profilo  Visita l'Homepage di immetella Invia a immetella un Messaggio Privato  Rispondi Quotando
Secondo me potresti riprovare l'incubazione a 4°C...ma è la prima volta che usi questo anticorpo o lo usavi già???
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aleinc
Nuovo Arrivato



2 Messaggi

Inserito il - 24 settembre 2010 : 15:26:59  Mostra Profilo  Visita l'Homepage di aleinc Invia a aleinc un Messaggio Privato  Rispondi Quotando
in effetti quando ho incubato a 4 ° ha funzionato... ma è davvero così importante la temperatura? potrei provare ad incubate 1 ora a temperatura ambiente?
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dukenukem
Nuovo Arrivato

Prov.: TS
Città: Trieste


1 Messaggi

Inserito il - 25 settembre 2010 : 16:56:58  Mostra Profilo  Visita l'Homepage di dukenukem Invia a dukenukem un Messaggio Privato  Rispondi Quotando
L'incubazione overnight a 4 gradi viene fatta per evitare aspecificità, altrimenti si usa fare 60 o 90 minuti a RT. Inoltre ti consiglierei di usare al posto dell'ECL il femto super signal della Thermo per avere un buon segnale anche nel caso in cui questo sia debole.
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ale88n
Nuovo Arrivato

Prov.: rm
Città: roma


51 Messaggi

Inserito il - 04 ottobre 2010 : 12:49:17  Mostra Profilo  Visita l'Homepage di ale88n Invia a ale88n un Messaggio Privato  Rispondi Quotando
sicuramente è colpa del incubazione a 20 riprova a +4
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