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tutimevolnesunimetol
Nuovo Arrivato
3 Messaggi |
 Inserito il - 11 novembre 2010 : 17:43:43
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allora......
ho immunoprecipitato delle proteine. ho fatto un gel con lo stacking al 4 e il running all 8......caricato e il gel sono 5 ore che corre e fa schifo.
ora. o ho polimerizzato male il gel..o.....
mi è venuto il dubbio che il running buffer non sia ottimale, me è nuovo e appena fatto..
una nota:
il gel corre ad amperaggio costante di 20 mA, il voltaggio solitamente è a 60V e poi decresce....ho controllato ora che butto tutto e il voltaggio è a 30V. qualcuno ha un idea dell esatto range di voltaggio che un gel dovrebbe avere? qual è la causa che solitamente fa decrescere il voltaggio durante la corsa??????
magari capisco cosa non è andata.
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Daria85
Utente
678 Messaggi |
Inserito il - 11 novembre 2010 : 19:11:19
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ciao. io si solito il gel lo corro anke a 120mV...e uso running che spaziano da 5 a 12,5 %.
secondo me è solo un problema di polimerizzazione del gel...magari APS e temed son partiti e non hanno fatto polimerizzare correttamente...
oppure può essere la T°..ovviamente se è molto bassa la polimerizzazione è più lenta...
ciao |
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tutimevolnesunimetol
Nuovo Arrivato
3 Messaggi |
Inserito il - 15 novembre 2010 : 09:51:12
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 viste cause ignote provo a rifare tutto...... veden. intanto grazie |
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