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tutimevolnesunimetol
Nuovo Arrivato

3 Messaggi

Inserito il - 11 novembre 2010 : 17:43:43

allora......
ho immunoprecipitato delle proteine. ho fatto un gel con lo stacking al 4 e il running all 8......caricato e il gel sono 5 ore che corre e fa schifo.
ora. o ho polimerizzato male il gel..o.....
mi � venuto il dubbio che il running buffer non sia ottimale, me � nuovo e appena fatto..
una nota:
il gel corre ad amperaggio costante di 20 mA, il voltaggio solitamente � a 60V e poi decresce....ho controllato ora che butto tutto e il voltaggio � a 30V. qualcuno ha un idea dell esatto range di voltaggio che un gel dovrebbe avere? qual � la causa che solitamente fa decrescere il voltaggio durante la corsa??????
magari capisco cosa non � andata.

Daria85
Utente

678 Messaggi

Inserito il - 11 novembre 2010 : 19:11:19

ciao. io si solito il gel lo corro anke a 120mV...e uso running che spaziano da 5 a 12,5 %.

secondo me � solo un problema di polimerizzazione del gel...magari APS e temed son partiti e non hanno fatto polimerizzare correttamente...
oppure pu� essere la T�..ovviamente se � molto bassa la polimerizzazione � pi� lenta...

ciao

tutimevolnesunimetol
Nuovo Arrivato

3 Messaggi

Inserito il - 15 novembre 2010 : 09:51:12

viste cause ignote provo a rifare tutto...... veden. intanto grazie