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vania
Nuovo Arrivato
Prov.: Milano
Città: milano
29 Messaggi |
Inserito il - 01 febbraio 2011 : 22:02:45
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Ciao a tutti, vorrei sapere come fare per sapere che percentuale di gel di poliacrilammide utilizzare sapendo il peso molecolare della proteina di interesse. Nel mio caso è all'incirca 50-60 kDa. Qualcuno sa spiegarmi come fare a scegliere sempre la migliore % di gel cosi da avere una buona separazione?
grazie
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Martin.diagnostica
Utente Attivo
  

1582 Messaggi |
Inserito il - 01 febbraio 2011 : 22:49:53
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12% vai + ke bene |
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0barra1
Utente Senior
   

Città: Paris, VIIème arrondissement
3847 Messaggi |
Inserito il - 02 febbraio 2011 : 01:51:16
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Comunque il modo migliore è partire da una percentuale che pare buona, come quella suggerita da martin, e poi tentare variazioni sul tema. Metodo empirico, in giro dicono che funzioni abbastanza bene 
Comunque dovresti trovare tabelle indicative su quale siano le migliori T e C per separare determinati p.m.. Se avessi più tempo andrei a scartabellare tra alcune slides di proteomica e credo che ti troverei qualcosa di simile.
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GFPina
Moderatore
    

Città: Milano
8408 Messaggi |
Inserito il - 02 febbraio 2011 : 19:06:28
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Trovi varie tabelle, ad es:

Poi in realtà varia anche dal tipo di gel e dal tampone di corsa che utilizzi. |
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Martin.diagnostica
Utente Attivo
  

1582 Messaggi |
Inserito il - 03 febbraio 2011 : 11:57:32
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Dalla tua slide sembrerebbe meglio addirittura al 10% |
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Dionysos
Moderatore
  

Città: Heidelberg
1913 Messaggi |
Inserito il - 03 febbraio 2011 : 18:50:29
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Io per mettere le 60 kDa al centro uso un 9%, anche 8 o 10 va bene. |
Volere libera : questa é la vera dottrina della volontà e della libertà (F.W. Nietzsche)
Less Jim Morrison, more Sean Morrison!
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