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silvietta82
Utente Junior
126 Messaggi |
 Inserito il - 29 marzo 2011 : 15:12:34
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Buon giorno a tutti. Devo produrre con il kit di trascrizione e traduziione in vitro dei pezzi di proteina con pM di circa 4 Kb (essendo i pezzi di DNA di partenza di 120bp). Eseguito il TNT qualcuno può suggerirmi un sistema per controllare l'effettiva produzione dei pezzi proteici.
Per il momento ho provato così:
ho caricato il prodotto di TNT in gel di poliacrillamide a gradiente (4-20%) e dopo la corsa e il trasferimento, ho incubato con Streptavidina (tenendo conto che eseguendo il TNT si utilizza t-RNA lisin-biotinilato)...
Non riesco a vedere le bande specifiche.
Qualcuno sa dirmi dove e cosa sbaglio o suggerirmi un metodo più idoneo per visualizzare pezzi proteici così piccoli. Grazie
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