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Emiliano_Biotech
Nuovo Arrivato
Prov.: VR
Città: Verona
10 Messaggi |
 Inserito il - 12 aprile 2011 : 19:20:16
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provo a risponderti:
per fare degli mAB devi immunizzare un animale per la proteina in questione, e dai linfociti B che ottieni fai l'ibridoma con cellule murine tumorali per ottenere la linea immortalizzata che ti produce un solo tipo di anticorpo. [un singolo clone B farà sempre lo stesso anticorpo].
A mio avviso non è detto che debba necessariamente conoscere l'intera sequenza proteica, dato che comunque gli Ab riconoscono alcuni motivi chiamati epitopi, e non sequenze a caso.
Io come soluzione proporrei una proteina di fusione con un epitopo noto, per un anticorpo monoclonale tranquillamente disponibile in commercio..in questo modo saresti in grado di purificarla, per poter cominciare delle analisi.
certo che per ottenere la proteina almeno la sequenza del gene la dovresti conoscere..o quantomeno avere una vaga idea delle sequenze fiancheggianti il gene, per poterlo isolare utilizzando degli enzimi di restrizione.
 spero di non aver scritto troppe cavolate! |
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Caratterizzare una proteina
Didattica
