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minnie_86
Nuovo Arrivato
Prov.: Napoli
18 Messaggi |
 Inserito il - 23 maggio 2011 : 17:03:16
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io sò che il glicerolo serve ad appesantire il mio DNA in modo che quando lo mvado a caricare nel pozzetto, questo non diffonda nel gel, ma il mio prof di molecolare mi ha detto che questo ha anche un'altra funzione, voi sapete quale? grazie 1000 a tutti
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Martin.diagnostica
Utente Attivo
1582 Messaggi |
 Inserito il - 23 maggio 2011 : 17:42:59
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Viene utilizzato anche quando si congelano le proteine purificate, un crioprotettore forse si confonde con questo. Francamente il tuo prof cerca il pelo nell'uovo. L'esame di BM non è una versione per Geek di chi vuol essere milionario perchè non ti interroga seriamente sull'utilità delle tecniche e la loro esecuzione?
Poi hanno non è sbagliato quando si sente dire ma voi a Biologia imparate solo idiozie!!! |
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minnie_86
Nuovo Arrivato
Prov.: Napoli
18 Messaggi |
Inserito il - 23 maggio 2011 : 17:51:53
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cmq non si tratta di un'esame, bensì di laboratorio e il prof faceva riferimento all'elasticità del campione ma nn ne sono sicura al 100% anche perchè in rete nn si parla altro che di aumento della densità per far precipitare il campione nel pozzetto.
p.s noi a biologia non impariamo idiozie |
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Martin.diagnostica
Utente Attivo
1582 Messaggi |
Inserito il - 23 maggio 2011 : 18:09:43
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Citazione:
Messaggio inserito da minnie_86
cmq non si tratta di un'esame, bensì di laboratorio e il prof faceva riferimento all'elasticità del campione ma nn ne sono sicura al 100% anche perchè in rete nn si parla altro che di aumento della densità per far precipitare il campione nel pozzetto.
Assolutamente d'accordo
Citazione:
p.s noi a biologia non impariamo idiozie
Sono biologo anche io |
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chick80
Moderatore
Città: Edinburgh
11491 Messaggi |
Inserito il - 23 maggio 2011 : 18:35:34
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Martin, ma è possibile che tu non possa dare una risposta normale, senza dover tirare fuori sempre cose che non c'entrano nulla?
Non mi sembra un bel modo di rispondere ad un nuovo utente del sito... |
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0barra1
Utente Senior
Città: Paris, VIIème arrondissement
3847 Messaggi |
Inserito il - 23 maggio 2011 : 18:53:09
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Citazione:
Messaggio inserito da minnie_86
cmq non si tratta di un'esame, bensì di laboratorio e il prof faceva riferimento all'elasticità del campione m
Ciao, benvenuta.
Non badare alla prima risposta che ti è stata data, Martin dorme poco e diventa suscettibile quando le ore di sonno scarseggiano 
Tant'è che anche io studio biologia eppure Martin mi vuole un sacco di bene. 
Comunque, tornando alla tua domanda, non capisco cosa intenda tu con elasticità del campione. Puoi riformulare?
Un'altra applicazione del glicerolo, correlata sempre però all'aumento di densità, è quella di contrastare l'azione di eventuali flussi elettroendosmotici, che si verificano in presenza di supporti recanti cariche elettriche, come per esempio nell'isoelettrofocusing oppure nel trasferimento da prima a seconda dimensione. Aumentando la densità del mezzo, infatti, il flusso della soluzione verso un elettrodo viene ostacolato, normalizzando (non in senso statistico, eh) la migrazione. |
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A Universe From Nothing, Lawrence Krauss
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SpemannOrganizer
Utente
Città: Los Angeles
955 Messaggi |
Inserito il - 23 maggio 2011 : 20:05:44
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| googolando un po' ho trovato che il glicerolo migliora la separzione delle bande di DNA (quindi la risoluzione) in elettroforesi capillare in poliacrilammide. Se abbia lo stesso effetto in gel d'agarosio, ahimé nn so dirtelo. |
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Martin.diagnostica
Utente Attivo
1582 Messaggi |
Inserito il - 23 maggio 2011 : 23:02:09
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Scusami minnie_86 se hai trovato la mia risposta fuori luogo, solo che anche nella mia esperienza, ho incontrato professori che con programmi di esame enormi ti andavano a chiedevano in sedute di esame cose di questo tipo che (forse x vedere se avevi seguito i corsi).
@chick80 mi sembra un pò infelice questa tua critica |
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Morfeo
Nuovo Arrivato
Città: Roma
110 Messaggi |
Inserito il - 24 maggio 2011 : 13:56:11
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Per fortuna che qualcuno fa il pelo nell'uovo nelle questioni di "chimica": faccio Genetica e biologia molecolare e sono in tirocinio in un laboratorio di Biochimica. Vedo sempre più diffuso il terrore e l'odio per la chimica/biochimica da parte di chi studia biologia molecolare, ergo meglio che ti facciano i cavilli!
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minnie_86
Nuovo Arrivato
Prov.: Napoli
18 Messaggi |
Inserito il - 24 maggio 2011 : 16:10:20
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grazie a tutti per la gentilezza che mostrate ai nuovi "arrivati" e grazie per le scuse martin, ma nn c'era bisogno nn mi sono offesa... cmq grazie.
per quanto riguarda la mia domanda il prof nel lab mi ha spiegato che ai campioni di DNA si aggiunge il buffer di caricamento che contiene 2 traccianti che servono per seguire la corsa (xilene e il blu di bromofenolo) e il glicerolo che serve ad appesantire il campione di DNA per meglio farlo precipitare nel pozzetto, il prof però ha fatto riferimento anche ad un altra "proprietà" del glicerolo ma nn ricordo cosa, nn ricordo se parlava di elasticità o di permeabilità elettrica....
grazie a tutti per le vostre risp |
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0barra1
Utente Senior
Città: Paris, VIIème arrondissement
3847 Messaggi |
Inserito il - 24 maggio 2011 : 16:56:42
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Si, una lane viene caricata con i molecular weight, che più che permetterti di seguire la corsa, a quello servono xilene e bbf, ti permettono poi di calcolare il peso molecolare apparente in SDS-PAGE per i tuoi analiti, rapportando la mobilità di questi ultimi ad una retta di calibrazione costruita a partire dal pm noto dei marker e alla loro mobilità elettroforetica relativa. I molecular weights possono permetterti di seguire la corsa se marcati in determinate maniere, che però rendono più difficile stabilire un pm apparante visto che possono esserci disparità nella marcatura dei marker, che migreranno perciò in modo meno uniforme e dando bande più larghe...
Ma in ultima analisi, quindi il secondo motivo per cui si usa il glicerolo ancora non lo sappiamo? |
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M111
Utente
Prov.: Lucca
Città: Guamo
838 Messaggi |
Inserito il - 24 maggio 2011 : 17:09:35
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| Comunque per quel che riguarda la verifica sulla corsa si può usare Blu di Bromofenolo, i marker ti possono servire proprio per il loro PM, per raffrontarle alla banda di interesse. |
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GFPina
Moderatore
Città: Milano
8408 Messaggi |
Inserito il - 24 maggio 2011 : 18:06:34
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In realtà l'unica risposta "vera" alla domanda l'ha data SpemannOrganizer!
Io concordo con lui, il glicerolo può migliorare la migrazione, quindi la risoluzione, delle bande in elettroforesi, il motivo è essenzialmente che modifica la conformazione del DNA.
Poi neanche io ne ho mai sentito parlare per l'elettroforesi su gel di agarosio, ma in genere per l'elettroforesi capillare.
Comunque minnie_86, credo che in ogni caso la cosa migliore sia chiedere al tuo Prof., una domanda è certo lecita!
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Discussione |
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A cosa serve il glicerolo nel buffer di caricamento?
Didattica
