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manubio
Nuovo Arrivato

2 Messaggi

Inserito il - 25 maggio 2011 : 12:13:08

Ciao a tutti!
Ho effettuato una maxi prep per� la prima centrifugata l'ho fatta a 13000 rpm e non a 6000 in quanto ho seguito un protocollo errato. Mi hanno detto che cos� facendo ho distrutto i batteri... Volevo sapere se � vero! Effettivamente il risultato non � stato eccezionale.
Vi ringrazio!

thejoint84
Nuovo Arrivato

46 Messaggi

Inserito il - 25 maggio 2011 : 20:47:01

E� probabile.... Io con Coli a volte uso 8000 rpm 5 min, e la differenza di densit� del pellet si vede rispetto alle centrifugate normali..... per risospenderlo ce ne vuole! 13.000rpm sono tanti!!!

http://cornermolecularbiology.blogspot.com/

cidsmoke
Utente Junior

534 Messaggi

Inserito il - 25 maggio 2011 : 21:24:51

Molto probabile...praticamente li hai frullati!

Martin.diagnostica
Utente Attivo

1582 Messaggi

Inserito il - 25 maggio 2011 : 22:07:16

Ho dei seri dubbi che con la tua centrifugata hai distrutto i batteri. Quando facevo le purificazioni di proteine ricombinate hist-tag per lisare i batteri dovevo sottoporli a pressioni elevatissime in French Press, magari bastasse dargli una botta in centrifuga

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giorgia22
Nuovo Arrivato

15 Messaggi

Inserito il - 31 maggio 2011 : 11:35:30

Sono daccordo con Martin .. lavoro con i batteri lattici, e da una brodocoltura per recuperare le cellule da usare come inoculo per la produzione di un lievito naturale ad es, uso velocit� di 10000 anch 11000 .. se poi penso ai vari step di cui si compone l'estrazione del dna batterico, non mi sembra possibile distruggere i batteri con una semplice centrifuga.
Ciao!

HPLC
Nuovo Arrivato

Citt�: Algeri - Reggio Emilia

18 Messaggi

Inserito il - 31 maggio 2011 : 11:53:19

Per me li hai distrutti, gia a 10000g si separa citoplasma da membrane e nuclei, a 13000.... ma supratutto, per quanto tempo lo hai fatto?

Domani � un'altro giorno

manubio
Nuovo Arrivato

2 Messaggi

Inserito il - 06 giugno 2011 : 16:36:47

L'ho effettuata per 15 minuti!!
Grazie