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ROMANO ELISA
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3 Messaggi

Inserito il - 14 ottobre 2011 : 09:06:44  Mostra Profilo  Visita l'Homepage di ROMANO ELISA Invia a ROMANO ELISA un Messaggio Privato  Rispondi Quotando
Ciao a tutti,
sto preparando Genetica per la vecchia LM in BCM di Urbino: non riesco proprio a capire il ragionamento che fanno nell' esempio sulla mappa di restrizione per due enzimi quali EcoRI e BamHI. Riporto il trafiletto del testo a cui mi riferisco:"Dato che ogni digestione singola separa una singola molecola di DNA in 3 frammenti,il frammento di DNA originale deve contenere due siti x ciascuna endonucleasi di restizione" (Biotecnologia molecolare,Bernard,Glick,Pasternak; pg 46.
Se qualcuno riesce ad aiutarmi ringrazio


Pro
Nuovo Arrivato




34 Messaggi

Inserito il - 14 ottobre 2011 : 11:19:48  Mostra Profilo  Visita l'Homepage di Pro Invia a Pro un Messaggio Privato  Rispondi Quotando
Secondo me devi vedere come tagliano questi due enzimi potrebbe esserti di aiuto....
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Mark G.
Nuovo Arrivato

0221_da_Luis 22



9 Messaggi

Inserito il - 14 ottobre 2011 : 16:57:14  Mostra Profilo  Visita l'Homepage di Mark G. Invia a Mark G. un Messaggio Privato  Rispondi Quotando
Forse si deve vedere il contesto da cui hai preso la frase e la eventuale sequenza scritta...perchè i due enzimi riconoscono e tagliano sequenze diverse e quindi la eventuale formazione di 3 frammenti se ci sono le sequenze di riconosc ci siamo, ma mi suona strano il fatto che "il frammento di DNA originale deve contenere DUE SITI x CIASCUNA endonucleasi di restizione"

Ciò che facciamo in vita, riecheggia nell'eternità.
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0barra1
Utente Senior

Monkey's facepalm

Città: Paris, VIIème arrondissement


3847 Messaggi

Inserito il - 14 ottobre 2011 : 19:24:10  Mostra Profilo  Visita l'Homepage di 0barra1 Invia a 0barra1 un Messaggio Privato  Rispondi Quotando
A me sembra ovvio.
E' evidente che se dopo aver trattato con una endonucleasi ottengo un frammento (open) ottengo tre frammenti più piccoli, ad aver avuto luogo sono stati DUE tagli.
Ora, se taglio con un altro enzima ed ottengo tre frammenti a partire dal medesimo DNA, allora nuovamente ho operato due tagli.
Se le endonucleasi in questione non sono isoschizomeri, cioè che non riconoscono la stessa sequenza, significa che tagliano punti diversi della molecola. Ognuna dovrà perciò avere due siti di restrizione.

So, forget Jesus. The stars died so that you could be here today.
A Universe From Nothing, Lawrence Krauss

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Mark G.
Nuovo Arrivato

0221_da_Luis 22



9 Messaggi

Inserito il - 14 ottobre 2011 : 20:34:42  Mostra Profilo  Visita l'Homepage di Mark G. Invia a Mark G. un Messaggio Privato  Rispondi Quotando
infatti concordo Obarra1 ! la cosa ke m suona strano è la frase: "il frammento di DNA originale deve contenere DUE SITI x CIASCUNA endonucleasi di restizione....cioè io l'interpreterei cosi che per ogni enzima ci sono 2 siti d restr, cioè 2 per eco e 2 per bam....e la cosa m suona strana.....se non erro sarebbe stato meglio dire invece: il frammento di DNA originale deve contenere DUE SITI, uno x CIASCUNA endonucleasi di restizione...

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0barra1
Utente Senior

Monkey's facepalm

Città: Paris, VIIème arrondissement


3847 Messaggi

Inserito il - 14 ottobre 2011 : 22:46:46  Mostra Profilo  Visita l'Homepage di 0barra1 Invia a 0barra1 un Messaggio Privato  Rispondi Quotando
Ad essere rigorosi, si.

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GFPina
Moderatore

GFPina

Città: Milano


8408 Messaggi

Inserito il - 15 ottobre 2011 : 00:42:24  Mostra Profilo  Visita l'Homepage di GFPina  Clicca per vedere l'indirizzo MSN di GFPina Invia a GFPina un Messaggio Privato  Rispondi Quotando
Citazione:
Messaggio inserito da Mark G.

..se non erro sarebbe stato meglio dire invece: il frammento di DNA originale deve contenere DUE SITI, uno x CIASCUNA endonucleasi di restizione...


No!
La frase è:
Citazione:
Dato che ogni digestione singola separa una singola molecola di DNA in 3 frammenti,il frammento di DNA originale deve contenere due siti x ciascuna endonucleasi di restizione

Sta tutto nelle parole "digestione singola" che vuol dire "digestione con un solo enzima di restrizione". Se digerissi con entrambi gli ER (EcoRI e BamHI), sarebbe una doppia digestione!
Quindi in sostanza la frase dice:
- se taglio "solo" con EcoRI ho 3 frammenti
- se taglio "solo" con BamHI ho 3 frammenti
quindi: ci sono 2 siti per EcoRI e 2 siti BamHI --> 2 siti per ciascun enzima
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Mark G.
Nuovo Arrivato

0221_da_Luis 22



9 Messaggi

Inserito il - 15 ottobre 2011 : 14:16:53  Mostra Profilo  Visita l'Homepage di Mark G. Invia a Mark G. un Messaggio Privato  Rispondi Quotando
Perfetto!!! Bellissima spiegazione GFPina !!!

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ROMANO ELISA
Nuovo Arrivato




3 Messaggi

Inserito il - 18 ottobre 2011 : 07:47:06  Mostra Profilo  Visita l'Homepage di ROMANO ELISA Invia a ROMANO ELISA un Messaggio Privato  Rispondi Quotando
Vi ringrazio molto. Debbo dire che spiegato così suona meglio pure a me.
Grazie
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