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CRISTIAN
Nuovo Arrivato
92 Messaggi |
 Inserito il - 01 dicembre 2011 : 10:33:17
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Ciao a tutti, vorrei verificare se una proteina ricombinante possiede attività dnasica, qualcuno sa come potrei fare? Esiste qualche protocollo a rigurado?
Grazie mille
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roberta.s
Utente Junior
Città: Parigi
564 Messaggi |
Inserito il - 01 dicembre 2011 : 12:23:06
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| Mah... dovreisti dirci di più riguardo la natura della proteina: ha una sequenza di legame a livello del DNA o taglia a caso? E' parte di un complesso? é espressa in quale organismo? |
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CRISTIAN
Nuovo Arrivato
92 Messaggi |
Inserito il - 01 dicembre 2011 : 14:13:25
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Si tratta di una proteina ricombinante espressa normalmente in alcune forme tumorali.
Quello che vorrei fare è vedere in vitro se il trattamento di questa proteina con del DNA lo taglia, e usare come controllo della Dnasi.
Qualcuno ha un protocollo? |
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roberta.s
Utente Junior
Città: Parigi
564 Messaggi |
Inserito il - 01 dicembre 2011 : 14:28:01
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| Ma sai dove taglia? Se si' puoi fare un southern blot |
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CRISTIAN
Nuovo Arrivato
92 Messaggi |
Inserito il - 01 dicembre 2011 : 14:55:47
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| non so nulla, devo solo verificare se taglia |
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chinasi84
Nuovo Arrivato
11 Messaggi |
Inserito il - 01 dicembre 2011 : 14:57:45
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Ciao,
non so se può fare al caso tuo..ma per saggiare la capacità di una sostanza di produrre danno al DNA (rottura a singolo o doppio filamento)si può utilizzare anche il Comet assay, un'elettroforesi su gel di agarosio su singola cellula.
Se vuoi però vedere qualcosa di altamente specifico e testare direttamente su DNA allora anch'io penserei ad un southern anche se non sono un'esperta. |
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CRISTIAN
Nuovo Arrivato
92 Messaggi |
Inserito il - 01 dicembre 2011 : 15:04:26
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| Scusate, ma prendendo del DNA umano e aggiungendo la mia proteina e come controllo lo stesso DNA trattato con DNasi, successivamente si carica in gel di agarosio e si valuta la degradazione? |
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chinasi84
Nuovo Arrivato
11 Messaggi |
Inserito il - 01 dicembre 2011 : 15:10:37
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| secondo me si..ti carichi anche il DNA di controllo ovvero quello non digerito ne dalla DNAsi ne dalla tua proteina e fai un paragone..potrebbe essere un test iniziale |
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Attività Dnasica proteine
Didattica
